九叶青花椒花器官发育相关ZaSCL3基因的筛选及功能研究.pdfVIP

目录

摘要I

ABSTRACTIII

缩略词列表VI

11

第章文献综述

1.花椒概况1

1.1花椒概述1

1.2花椒的分子生物学研究进展2

2.国内外研究现状4

2.1调控植物花器官发育的关键因素4

2.2GRAS转录因子研究进展5

2.3GRAS蛋白家族在植物花器官形成中的作用9

2.4GRAS蛋白与IDD家族基因协同调控植物生长发育10

2.5RNA-Seq技术在花椒研究中的应用10

2.6转录因子调控花椒花器官发育的研究11

3.本研究的目的与意义12

4.研究内容和技术路线13

4.1研究内容13

4.2技术路线图14

215

第章材料与方法

1.实验材料15

1.1植物材料15

1.2实验菌株和载体15

1.3实验试剂15

1.4培养基配方16

1.5仪器设备17

1.6本实验所用引物18

2.实验方法18

2.1形态学和解剖学观察18

2.2转录组测序18

2.3九叶青花椒GRAS转录因子的鉴定19

2.4ZaGRAS蛋白系统发育树构建20

2.5ZaGRAS蛋白保守结构域分析20

2.6ZaGRAS表达模式分析20

2.7ZaSCL3超表达载体构建20

2.8番茄遗传转化24

2.9超表达植株鉴定25

2.10超表达植株表型分析25

2.11LC-MS/MS检测植物激素含量25

2.12转基因植株转录组测序25

2.13酵母双杂交系统25

2.14双分子荧光互补（BiFC）27

2.15数据统计与分析28

329

第章结果与分析

3.1九叶青花椒雌雄花和果实形态观察29

3.2九叶青花椒GRAS转录因子的鉴定30

3.2.1GRAS家族成员的鉴定30

3.2.2GRAS家族系统发育分析30

3.2.3GRAS家族保守基序分析31

3.2.4GRAS转录因子在花和果实发育期的表达模式分析33

3.3ZaSCL3转基因功能解析34

3.3.1CaMV35S-K303-ZaSCL3超表达载体构建34

3.3.2转基因植株获得35

3.3.3ZaSCL3超表达植株表型鉴定35

3.3.4LC-MS/MS测定植物激素含量41

3.4ZaSCL3在九叶青花椒花器官发育中的作用机制研究42

3.4.1ZaSCL3超表达植株RNA-Seq测序概述42

3.4.2ZaSCL3转基因植株激素代谢和信号转导基因显著变化43

3.4.3ZaSCL3超表达植株多个转录因子基因的表达呈显著差异48

3.4.4ZaSCL3互作蛋白的筛选鉴定51

3.4.5赤霉素在花椒成花及花器官形成中的作用分析54

456

第章讨论与结论

4.1讨论56

4.2结论58

55