3.2基因工程的基本操作程序第2课时课件 高二下学期生物人教版选择性必修3.pptxVIP

第三章第二节

基因工程的基本操作程序;本节

聚焦;知识回顾——快问快答;知识回顾——快问快答;将目的基因导入受体细胞;二、将目的基因导入受体细胞;二、将目的基因导入受体细胞;二、将目的基因导入受体细胞;二、将目的基因导入受体细胞;二、将目的基因导入受体细胞;二、将目的基因导入受体细胞;二、将目的基因导入受体细胞;二、将目的基因导入受体细胞;目的基因的检测与鉴定;三、目的基因的检测与鉴定;DNA片段的扩增及电泳鉴定;三、DNA片段的扩增及电泳鉴定;三、DNA片段的扩增及电泳鉴定;三、DNA片段的扩增及电泳鉴定;三、DNA片段的扩增及电泳鉴定;三、DNA片段的扩增及电泳鉴定;三、DNA片段的扩增及电泳鉴定;1．受体细胞不同，将目的基因导入受体细胞的方法也不完全相同，下列受体细胞与导入方法匹配错误的是();解析：花粉管通道法是我国科学家独创的一种方法，我国的转基因抗虫棉就是用此种方法获得的，A正确；农杆菌转化法适用于双子叶植物和裸子植物，Ca2+处理法能使大肠杆菌细胞的生理状态发生改变，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，所以将目的基因导入大肠杆菌细胞，常采用Ca2+处理法，B错误；显微注射法的受体细胞一般为动物受精卵，则将目的基因导入羊受精卵的方法是显微注射法，C正确；在自然条件下，农杆菌能侵染双子叶植物和裸子植物，因此农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞常用的方法，但大多数单子叶植物不能用该方法，番茄是双子叶植物，可用农杆菌转化法将目的基因导入番茄细胞，D正确。;2．目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过鉴定和检测才能知道。下列属于目的基因检测和鉴定关键步骤的是()

A．检测受体细胞是否有目的基因

B．检测受体细胞是否有致病基因

C．检测目的基因是否转录mRNA

D．检测目的基因是否翻译蛋白质;解析：检测受体细胞中是否有目的基因是鉴定和检测的第一步，即便受体细胞中存在目的基因，也不能说明目的基因一定会稳定遗传并表达，A错误；目的基因不一定是致病基因，B错误；即使检测到目的基因成功转录mRNA，也不一定能否翻译成相应的所需蛋白质，所以该步不是最关键的步骤，C错误；检测目的基因是否翻译蛋白质是检测目的基因是否表达的最后步骤，如果存在该蛋白质，说明目的基因能在受体细胞内稳定存在并能表达，D正确。;3．将马铃薯胰蛋白酶抑制剂基因PinⅡ导入杨树细胞，培育成了抗虫杨树。如图表示含目的基因的DNA分子和农杆菌质粒，图中Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Neor表示新霉素抗性基因，箭头表示识别序列完全不同的4种限制酶的切割位点。下列叙述不正确的是()

;A．目的基因插入到质粒的T－DNA上，才能整合到受体细胞染色体中

B．为使目的基因与质粒高效重组，最好选用EcoRⅠ和PstⅠ

C．成功导入重组质粒的细胞会表现为不抗氨苄青霉素、抗新霉素

D．转化了的杨树细胞在合适条件下经脱分化即可形成抗虫杨树;解析：农杆菌Ti质粒上的T－DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上，因此，目的基因插入质粒的T－DNA上，可整合到受体细胞染色体中，A正确；为保证目的基因的完整性，不能选用BamHⅠ；为防止自身环化，应选用目的基因两侧的两种不同的限制酶；重组质粒中至少要保留一个抗性基因，TthⅢ1和PstⅠ只能选其中一个；因此可选用EcoRⅠ和TthⅢ1或者EcoRⅠ和PstⅠ；为保留重组质粒中的复制原点，最好选用EcoRⅠ和PstⅠ，B正确；用EcoRⅠ和PstⅠ切割会破坏氨苄青霉素抗性基因，但不会破坏新霉素抗性基因，因此成功导入重组质粒的细胞会表现为不抗氨苄青霉素，但能抗新霉素，C正确；转化了的杨树细胞在合适条件下经脱分化与再分化可形成抗虫杨树，D错误。;4．关于“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验，下列相关叙述正确的是

()

A．PCR仪实质上就是一台能自动调控温度的仪器，但在使用时需根据扩增的DNA片段以及引物的情况人工设定合适的温度

B．PCR反应体系中需加入耐高温的DNA聚合酶，该酶主要在复性过程中起作用

C.为避免外源DNA等因素的污染，PCR实验中使用的微量离心管、枪头、蒸馏水和移液器等在使用前都必须进行高压灭菌处理

D．电泳时，电泳缓冲液不能没过凝胶，以免凝胶加样孔中的电泳样液流出;解析：PCR仪实质上就是一台能自动调控温度的仪器，但在使用时需根据扩增的DNA片段以及引物的情况人工设定合适的温度，A正确；PCR反应体系中需加入耐高温的DNA聚合酶，该酶主要在延伸过程中起作用，B错误；为避免外源DNA等因素的污染，PCR实验中使用的微量离心管、枪头、蒸馏水等在使用前都必须进行高压灭菌处理，移液器不需要高压灭菌，C错误；电泳时，电泳缓冲液以没过凝胶1mm为宜，D错误。;5．