组织胚胎学基础：HE 染色技术课件.pptxVIP

组织胚胎学基础：HE染色技术课件演讲人

01前言02病例介绍03护理评估（技术操作前的全流程核查）04护理诊断（技术操作中的常见问题定位）05护理目标与措施（精准解决问题的“技术处方”）06并发症的观察及护理（染色后问题的“急救指南”）07健康教育（让新手少走弯路的“经验传承”）08总结目录

01前言

前言我站在实验室的显微镜前，看着学生们围成一圈，目光紧盯着载玻片上那抹淡紫与粉红的交叠——这是HE染色（苏木精-伊红染色法）的经典色彩。作为从事组织胚胎学教学与技术指导十余年的实验员，我始终觉得，HE染色不仅是组织学最基础的技术，更是打开微观生命世界的“钥匙”。它像一位沉默的翻译官，将组织细胞内的核酸、蛋白质、胶原纤维等成分，转化为肉眼可见的蓝紫色（苏木精染细胞核）与粉红色（伊红染细胞质及细胞外基质），让我们得以“读懂”组织的结构与病变。

记得刚入行时，带教老师拍着我的肩说：“HE染色看似简单，实则藏着无数‘讲究’。你若能把每一张切片都染得‘核浆分明、层次清晰’，那才算真正入了门。”这些年，我带过百余名学生，见过因固定不及时导致细胞自溶的模糊切片，也遇过因分化过度只剩一片粉红的“空白片”。今天，我想以最真实的视角，从一个“过来人”的经验出发，结合这些年积累的典型案例，和大家聊聊这门“看似基础，实则精妙”的HE染色技术。

02病例介绍

病例介绍去年秋天，病理技术班的学生进行阶段性考核，要求独立完成“大鼠肝组织HE染色”。其中一名学生小周的切片让我印象深刻——低倍镜下，肝小叶轮廓勉强可见，但肝细胞的细胞核几乎呈淡灰色，细胞质与肝血窦的边界也模糊不清；高倍镜下更糟糕，部分区域甚至能看到细胞碎片，整个切片像被蒙了一层“薄雾”。

小周急得直搓手：“老师，我按步骤做的啊！固定用的10%中性福尔马林，脱水从70%到100%乙醇各1小时，透明用二甲苯两次各15分钟，浸蜡60℃两小时，切片3μm，烤片60℃30分钟，苏木精染10分钟，盐酸乙醇分化5秒，伊红染3分钟……每一步都没偷懒！”

病例介绍我接过她的操作记录，又检查了她的试剂：福尔马林pH值6.8（正常应7.0-7.2），苏木精染液配制已超过3个月（未及时过滤），伊红染液中冰醋酸浓度偏低（仅0.1%，常规0.5%-1%）。再看切片贴附情况——部分区域有细微卷边，烤片时可能温度不均。这张“失败切片”，其实是多环节操作偏差的“集合体”。

03护理评估（技术操作前的全流程核查）

护理评估（技术操作前的全流程核查）在HE染色中，“护理评估”更像是对技术操作各环节的“全面体检”。它不是简单的“检查试剂是否够用”，而是从标本采集到封片的全流程风险预判。结合小周的案例，我将评估重点总结为以下四方面：

标本质量评估标本是染色的“原材料”，其状态直接决定结果。需评估：①取材时间：是否在组织离体后30分钟内固定？超过1小时，细胞自溶酶会破坏结构（小周的大鼠肝组织虽及时取材，但固定液pH偏低，影响了蛋白质交联）；②标本大小：是否≤2cm×1.5cm×0.3cm？过厚会导致固定液渗透不均；③组织类型：肝、肾等实质器官需避免挤压，胃肠等空腔器官需展平固定（小周的肝组织虽未挤压，但固定液pH偏差已影响后续染色）。

试剂状态评估这是最容易被忽视却最关键的环节。需检查：①固定液：10%中性福尔马林的pH是否在7.0-7.2？酸性环境会导致核染色浅（小周的问题根源之一）；②脱水剂：各级乙醇浓度是否准确？70%乙醇若被水稀释，会导致脱水不彻底，后续透明时出现“白色浑浊”；③苏木精染液：是否为新配制或过滤后使用？存放过久的苏木精会产生沉淀，附着在切片上形成“背景污染”（小周的苏木精染液已3个月未过滤，切片上隐约可见细小颗粒）；④伊红染液：冰醋酸浓度是否达标？醋酸能增强伊红对细胞质的亲和力，浓度过低会导致胞质着色浅（小周的伊红液醋酸仅0.1%，直接导致胞质与血窦分界不清）。

设备与环境评估烤片机温度是否均匀？小周的切片有卷边，可能是烤片时载玻片局部温度过高（超过65℃）导致组织收缩；切片机刀片是否锋利？钝刀片会导致切片厚薄不均，影响染色均匀性；实验室湿度是否＜60%？高湿度会导致苏木精分化时水分残留，核染色不清晰。

操作者技能评估学生是否掌握“捞片”技巧？小周的切片部分区域有褶皱，可能是捞片时镊子夹取位置不当；是否理解“分化”的本质？她只记了“盐酸乙醇分化5秒”，却不明白分化是为了溶出核内过多的苏木精，保留与DNA结合的部分——时间过短，核会过深；过长，核会脱失。

04护理诊断（技术操作中的常见问题定位）

护理诊断（技术操作中的常见问题定位）基于多年带教经验，HE染色的“护理诊断”可归纳为以下五类，每类问题都像一面镜子，照见操作中的薄弱环节：

核着色过浅或缺失（对应小周的“淡灰色核”）可能原因：①固定液pH偏低，