《羊草远缘杂交技术规程》（DB15T 4306-2026）.docxVIP

ICS65.020.01CCSB05

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内蒙古自治区地方标准

DB15/T4306—2026

羊草远缘杂交技术规程

TechnicalcodeofpracticefordistanthybridizationofLeymuschinensis

2026-02-10发布2026-03-10实施

内蒙古自治区市场监督管理局发布

DB15/T4306—2026

I

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由内蒙古自治区农牧厅提出。

本文件由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会（SAM/TC19）归口。

本文件起草单位：中国农业科学院草原研究所。

本文件主要起草人：杨艳婷、武自念、田春育、宫文龙、刘乐萌、李志勇、娜娜、陈晓菲、李思玉、李事超。

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DB15/T4306—2026

羊草远缘杂交技术规程

1范围

本文件规定了羊草与其近缘种远缘杂交育种的程序、杂交亲本、花期调节、杂交、幼胚挽救、杂交后代真伪性鉴定和杂交后代扩繁等要求和规范。

本文件适用于羊草与近缘种的杂交育种。

2规范性引用文件

本文件没有规范性引用文件。

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

远缘杂交distanthybridization

不同种间属间甚至亲缘关系更远的物种之间的杂交。

3.2

近缘种closelyrelatedspecies

同科或同属内亲缘关系较近、染色体存在部分同源性的物种。

4杂交亲本

4.1亲本本底调查

调查羊草远缘杂交亲本的遗传背景信息、产量、品质、抗性等特性，以及染色体核型、倍性、花粉活力和柱头可授性等。

4.2亲本选择

根据育种目标，选取生长状况良好、花粉活力高、柱头可授性强，优良性状突出，缺点少，且优势互补的种质材料作为亲本。以羊草为母本时，优先选择亲和性高的新麦草、黑麦草等为父本；以羊草为父本时，优先选择亲和性较高的小麦等为母本。

5花期调节

5.1生育期调控

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DB15/T4306—2026

对于一年生的小麦、黑麦草等杂交亲本，可在温室(3月初、3月中旬、4月初、4月中旬、9月初、9月中旬)或大田(4月初、4月中旬、4月底)分批种植，使其与羊草花期相遇。

5.2花期调控

对于多年生的羊草、赖草、新麦草等杂交亲本，可通过0℃~4℃低温进行春化处理7d～10d,冬季在温室采用温度(18℃~25℃)、光调控(16h光照、8h黑暗、光照度5000LUX～8000LUX)等措施，促使杂交亲本开花、花期相遇。

6杂交

6.1杂交植株选择

宜选择生长发育良好、健壮、无病虫害、具有亲本典型性状的植株作为杂交亲本。

6.2母本去雄

宜选择晴天9:00～11:00对即将开放的母本雌花序进行人工去雄，将雄蕊去除干净，注意切勿伤到柱头，在3d内完成授粉。

6.3授粉

6.3.1花粉采集

选择健壮、即将散粉的父本穗子进行套袋，新麦草等近缘种父本于11:00～14:00时采集花粉，羊草父本于15:00～18:00时采集花粉。待花药散粉前，采集整穗的花粉，置于干燥、透气的硫酸纸袋中，作上标记。采集的花粉在6h内完成授粉。

6.3.2授粉方法

将采集到的父本花粉用毛笔蘸取、直接涂在去雄的母本雌蕊柱头上，重复2～3次。

6.4套袋标记

授粉完成后用硫酸纸袋将整个花序套入后固定，挂上标签。标签上注明杂交母本和父本、花序编号以及杂交日期、地点、人员信息。

7幼胚挽救

授粉后14d~18d膨大但尚未完全硬化(或颖果呈乳白色)的种子，经消毒后剥取幼胚，接种到MS(MurashigeandSkoog)+GA?培养基上，诱导生长至完整植株后，经室内炼苗一周左右，移栽至大田。

8杂交后代真伪性鉴定

利用形态学观察、分子标记技术、流式细胞仪倍性检测、核型分析等方法鉴定已移栽到大田中的植株，鉴定其杂交后代的真伪性。

9杂交后代扩繁

DB15/T4306—2026

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利用组织培养技术将真实杂种后代的幼穗、茎等外植体接种到诱导愈伤组织培养基上进行愈伤诱导、分化、生根培养至完整植株，或通过分蘖、根茎扩繁。