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藻类的分离和培养

微型藻类的分离和培养方法基本上与菌类的方法相似，但还需加上光

照条件，并以液体培养为主。在大量培养时，可不必考虑无菌条件。

一、目的

学习藻类的分离和培养方法

二、药品、材料和用具

水生生物培养槽，玻璃片（面积稍大于培养槽），橡皮管，显微镜，

三角烧瓶，试管，筛绢，棉塞，微吸管，凹玻片，灭菌锅，载玻片，吸管，

培养皿，人工光源，木盆（或小型实验池），充二氧化碳气钢瓶，抽气泵，

离心机。

土壤抽出液，青霉素，链霉素，琼脂，硝酸钙，磷酸二氢钾，磷酸氢

二钾，过磷酸钙，硫酸镁，氯化钾，碳酸钠，三氯化铁，硅酸钠，葡萄糖，

蛋白胨，硫酸铵，硝酸铵，氯化钙，碳酸氢钠，钼酸，氯化钠，柠檬酸铁，

硫酸锰，人尿，海泥抽出液，食盐。

三、操作

生长在静水或水流缓慢河流中的藻类，培养比较容易。取到实验室后，

要立刻从材料瓶中移到宽大的水生生物培养槽内。为了培养大的丝状藻，

要利用宽的、不高的容器。这些容器要用玻片盖住，以防止培养物受灰尘

沾污。倒入容器的水要达到容器高度的一半，或稍多些，使水面上还有充

分空气。在容器边缘，要用一小块纵切橡皮管垫住，可使玻片不致紧贴容

器，空气才能进入容器中。细微的藻类如团藻目、硅藻门能很好地生活于

培养皿中。很多藻类如颤藻属、水绵属的若干种、轮藻属等可在实验室中

保存很多年。

在迅速流动水中生长的藻如丝藻属、毛枝藻属等比较难于培养，因为

它们要求经常输入氧气。在水层较高水中，在高容器中，这些藻类迅速地

死亡。为了把这些藻类保存到实验时，应当把它们分成一些小部分，放在

水层较薄的、宽的容器内，并须常常换水，把空气吹入水中。还可以用橡

皮管把水生生物培养槽和水龙头连结起来，建立有流水的水生生物培养槽。

在水生生物培养槽中培养藻类时，应尽可能创造和保持藻类天然生存

条件。把藻类培养在从采集藻类那一水域取来的水中，或其他天然水（尤

其不能用自来水，因其中含很多氯气，必要的话，也须置较长时间，或加

以煮开），或在水中加入混合养料，这些养料是由制造有机物质所必需的

矿质盐构成。

在夏季，不要把藻类培养物放在直射太阳光下，而要放在凉爽的场所，

例如向北窗台上。在秋、冬季节，如希望藻类保持积极生活活动状态，就

要把培养物移到有人工光照处。

以上是一般藻类粗放的培养、保存方法。如要作较深入实验，需注意

以下问题：

1．藻种的分离

藻类培养首先要有藻种。从天然水域的混杂生物群中，用一定方法把

所需藻类个体分离出来，而获纯种培养。这种方法称为藻种分离和纯化，

又称纯培养法。

真正的“纯种培养”是指在排除包括细菌在内的一切生物的条件下进

行的培养。这是进行科学研究不可缺少的技术，而在生产性培养中不排除

细菌的称之为“单种培养”。

（1）采样和预备培养：首先要采集有需要分离藻类的水样，采回后

在显微镜下检查。如发现需要分离的藻类数量较多时，可立即分离。若数

量很少，最好先进行预备培养，待其增多后，再分离。

用作预备培养的培养液，各种藻类是不同的，对一些难以培养的藻类

一般加入土壤抽出液较好。预备培养液营养成分浓度应小些，一般只有原

配方的1/4～1/2。如水样中藻类种类较多，就应使用几种不同的培养液，

使藻类在适合于自己繁殖的培养液中繁殖起来。

可用三角烧瓶或试管作培养容器，加入容量1/4～1/3培养液。然后

把经筛绢过滤除去大型浮游生物的水样接种进去，放在合适温度下或室内

靠北窗口下培养。在培养附着藻类时，容器可静止不动；而培养浮游藻类

时，应该每天摇动一次。

有的藻类在普通培养液中完全不能繁殖，有的繁殖非常困难。此时需

改变培养液浓度，加入葡萄糖、蛋白胨等有机物，补充微量元素和辅助生

长物质，加入土壤抽出液，就有可能获较好效果。

土壤抽出液制作方法：先在试管底部，加入高约1cm土壤（采用腐殖

化的农田和庭院土）。再加入水使达5cm，塞上棉塞，采用蒸气间隙灭菌，

每天灭菌1小时，连续二天。由于气泡上升，棉塞可能弄脏。因此，最好

先在水中煮一段时间，使气泡跑掉后，再加棉塞进行灭菌。

（2）分离方法：常用下列四种。

1）微吸管（毛细管）分离选直径较细（约5毫米）玻管，在火焰上

加热，待快熔时，快速拉成口径极细的微吸管。将稀释适度藻液水样，置

浅凹载玻片上，镜检。用微吸管挑选要分离的藻体，