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可溶性总糖测定

提取：称样0.1克，加7ml浓度为80%的乙醇于10ml离心管中，摇匀（在震荡

机上）；80℃水浴30分钟，3000rpm离心10min，倒出上清液于25ml试管中（第

一遍用少量酒精润洗，后面两遍可以不润洗）。加7ml80%乙醇，80℃水浴30分

钟，3000rpm离心10min，倒出上清液，共提取三次。定容25ml。（定容后，必

须将容量瓶内的液体摇匀）测定：吸出提取液0.1ml（空白组加入0.1ml酒精），

加5ml蒽酮硫酸溶液，90℃煮15分钟，冷却(冷水)后吸取（先将试管内溶液

摇匀再用移液枪移取0.2ml到比色板上）620nm比色。（每块比色板最后一个

空格，必须加入空白对照）

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可溶性总糖（%）=[(C*V/A)/(W*10)]*100

C—从标准曲线查得的糖量（ug）V—样品提取液的总体积（ml）

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A—显色时取用的样液量（ml）W—样品干重（g）10—g变ug

计算：=C*25/0.1*100/(m*1000000)

试剂：80﹪的乙醇：8瓶500ml乙醇+1L水

蒽酮硫酸溶液：150mg蒽酮溶于100ml浓硫酸（76ml浓硫酸加入到30ml水中）

0.9868g蒽酮溶解于80﹪稀硫酸（500ml浓硫酸溶解于197.5水中）。

蒽酮硫酸溶液配好后必须在当天配制当天使用，并且越快使用越好

附加：

标准曲线制作：取6支大试管，从0～5分别编号，按表24-1加入各试剂。

表24-1蒽酮法测可溶性糖制作标准曲线的试剂量

管号

试剂

012345

100μg/mL葡萄糖溶液00.20.40.60.81.0

（mL）

蒸馏水（mL）1.00.80.60.40.20

蒽酮试剂（mL）5.05.05.05.05.05.0

葡萄糖量（μg）020406080100

将各管快速摇动混匀后，在90℃水浴中煮10min，取出冷却，吸取？在620nm波长下，

用空白调零测定光密度，以光密度为纵坐标，含葡萄糖量（μg）为横坐标绘制标准曲

线。

葡萄糖溶液：0.1g葡萄糖（105℃,6h）定容至1L。

常用的浓硫酸中H2SO4的质量分数为98.3%，其密度为1.84g·cm-3，其物质的

量浓度为18.4mol·L-1。