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实验报告

课程：植物生理学实验题目：植物组织中可溶性糖含量的测定

一.【实验原理】

植物的代谢活动随着植物的发育过程而不断发生着变化，碳水化

合物的代谢也不例外，其含量也随之发生变化，在种子萌发过程中，

在光合作用受到影响时和受到外界环境的胁迫等情况下植物可溶性

糖含量都会发生变化。了解植物可溶性糖含量的变化，在生理上与实

践上都有重要意义。

蒽酮比色法是常用的测定可溶性五碳糖和六碳糖的方法，糖在硫

酸的作用下脱水生成糠醛，糠醛再与蒽酮作用形成一种绿色的络合

物，在一定的浓度范围内颜色的深浅与糖含量成正比，可以用比色法

测定。该法简便，但没有专一性，绝大部分的碳水化合物都能与蒽酮

反应产生颜色。

二.【实验步骤】

1、标准曲线的绘制

用糖标准溶液配制成浓度为0μg／mL，50μg／mL，100μg／mL，

150μg／mL，200μg／mL的糖标准使用溶液各10mL

分别吸取上述糖标准使用溶液各1mL于一洁净是试管中，加蒽酮

试剂5mL混合，于沸水浴中煮沸10分钟

取出冷却后用分光光度计测定其在600nm波长处的吸光度值

以吸光度值为纵坐标，以糖浓度为横坐标，绘制标准曲线

2、可溶性糖的提取

称取0.250g新鲜的植物叶片于研钵中，加少许乙醚仔细研磨，直

至成匀浆为止

用热水（70℃）少许洗涤研钵，并将植物材料全部转移到100mL

烧杯中，再加入蒸馏水30~40mL，将烧杯放在70℃~80℃水浴中约

半小时

冷却后滴加饱和中性醋酸铅以除去浴液中的蛋白质，连同残渣一并

洗入100mL容量瓶中定容，充分摇匀

用干燥漏斗将上述溶液过滤于一干燥的三角瓶中，瓶中事先放入少

量（0.2~0.4g）的草酸钠粉末，摇动三角瓶，除去过量的铅，使生

成草酸沉淀

再次过滤，得到透明溶液即为可溶性糖提取液

3、提取液的显色及比色

吸取上述糖提取液1mL于一洁净是试管中，加蒽酮试剂5mL，混

匀，于沸水浴中煮沸10分钟（此过程应与标准曲线管同步进行）

取出冷却后，用分光光度计测定其在600nm波长处的吸光度值

从标准曲线上查得滤液中的糖含量，然后计算样品中塘的含量

三.【实验结果】

实验中测得的数据如下所示：

溶液蒸馏水0μg／50μg100μg150μg200μg待测样品

mL／mL／mL／mL／mL123

A60000.2910.6000.8441.2321.3960.5520.5600.538

若以1号管调零，处理后数据如下：

溶液0μg／50μg100μg150μg200μg待测样品

mL／mL／mL／mL／mL123平均

A60000.3090.5530.9411.1050.2610.2690.2470.259±0.01

作出标准曲线如下：

标准曲线

y=0.0058x

2

R=0.9889

1.4

1.2

1

0