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微物学检查法验证与评价要求

微物学检查法验证与评价要求

审评三部霍秀敏宁黎丽成海平魏农农

摘要：本系统阐述了微物限度和菌检查法验证的内容和技术评价要求，的是规范微物限度和菌检查法验证

作，供注册申请在进微物限度和菌检查研究时参考，微物限度和菌检查的评价要求，可于具体的审评作。

关键词：微物学检查；法验证；评价要求。

、概述

本中的微物学检查法包括微物限度检查法和菌检查法。微物限度检查法系检查规定灭菌制剂及其原料药、辅料

受微物污染程度的法；包括细菌数、霉菌数、酵母菌数及控制菌检查。菌检查法系于检查药典要求的菌药品、原料

药、辅料等是否菌的法；若检查结果符合规定，表明在该检验条件下未发现微物污染。

中国药典2000年版及以前的版本虽然收载了微物限度检查法和菌检查法，但在如何保证检验法的科学性及检验结果的

准确性存在些问题，与国外药典的相关要求较有定差距，关键是未明确对检验法进必要的法学验证。以前品

种的申报资料中般仅提供微物限度检查或菌检查的检查结果，法学验证内容。但从保证药品安全性的实际出发，不

同品种需要选择建各适当的检查法，即使是仿制药，由于不同产企业采的艺、辅料等的不同，其产品可能表现出

不同的抑菌特性，进微物限度检查或菌检查时，具体的检查法也不能简单地照搬，需要通过试验验证核实已有的试验

法和检测系统是否适，因此，也需要进必要的法验证。

中国药典2005年版对微物限度检查法和菌检查法进了修订完善，明确规定进药品微物限度检查或菌检查时应进

法验证，的是确认试验中应选择药典收载的何种供试液制备法、何种测定法，以及验证确定的检测系统是否适于

该药品的检验。如果供试品有抑菌性，影响测定结果，则应采适当的法消除供试液的抑菌活性后再进检查。也就是说，

只有通过法验证，才能确定针对具体品种的具体的检验法，保证采的法的科学性和检验结果的准确性。

、法验证的思路

先了解供试品是否有抑菌性、抑何种菌，再考虑选择适当的法消除或降低供试品的抑菌性，然后试验验证所采的法

已经消除了抑菌性（能使加的各种试验菌长良好），特别是能满对产品最敏感菌的长；最后将所作的试验记录在

案，形成确认该供试品在该检验量及该检验条件下，已充分消除抑菌性，能确保试验结果准确可靠的验证报告。

微物限度和菌检查法验证试验可概括描述为：在采的检验法和过程中，通过分别加规定量的代表性微物，以验

证供试品是否在规定的检验量、在所采的检验条件下抑菌性，或已充分消除了抑菌性（供试品本的以及操作系统中可能

对微物长有影响的各种因素），并且所法对微物长不良影响，从确认检验法的有效性，保证检验结果的准

确可靠。整个试验过程中的每个环节均应有合理的证明，保证其对结果的判断没有影响。

三、法验证的重点

1、验证制成适宜供试液的前处理法，证明法对微物长、检出影响。

2、验证样品有抑菌性、抑什么菌？最敏感的菌是那个？其结果将直接影响后续检验法的选择和操作步骤的进，同时

是最终所选检验法和操作步骤合理性的证明。

3、验证消除样品抑菌性的法，证明法的有效性及法对污染菌长影响；如何选择合理、适宜、简单有效的消除抑菌

性的法是当前验证作的关键。

四、法验证的步骤与内容

1、制备验证试验菌液

按药典菌检查法中培养基灵敏度检查项中试验菌液的制备法将规定需的试验菌分别制成每毫升中含10～100个菌

（CFU）的供试菌液。

2、样品的前处理法

样品的前处理法是验证试验的部分，需证明所的处理法对各试验菌的长影响。

根据供试品的性状，选以下适宜的法，或种法联合使：

溶解：验证所溶液、助溶剂和浴助溶温度对微物的长影响。

乳化：验证所乳化剂和浴助溶温度的有效性、使量及对微物的长影响。

破乳：验证所破乳剂的有效性、使量及对微物的长影响。

萃取：验证有机相选择的合理性、有效性及对微物的长影响。

稀释：验证降低供试品相对抑菌浓度的有效稀释倍数。

离：验证所转速、时间和微物的分布情况。

应说明采取某种前处理法的原因，如样品不需要特别的前处理就能制成均匀的供试液，这步可以省掉，直接进确定样品

有抑菌性的步骤。

3、确定供试品是否有抑菌性、抑什么菌？

通过献资料或申报资料中的药效学资料，了解其对不同细菌的MIC，参考已经验证过

的品种、抗菌药物可根据抗菌