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乌天麻菌种及菌棒制备技术规程

1范围

本规程规定了乌天麻（GastrodiaelataBl.f.glaucaS.Chow）菌种（母种、原种、栽培种）及菌棒制备的术语和定义、总则、材料与设备准备、菌种制备、菌棒制备、质量控制、包装与储存、安全环保及档案管理等内容。

本规程适用于科研单位、育苗基地及相关企业开展乌天麻菌种繁育、菌棒规模化制备工作，涵盖蜜环菌（Armillariamellea(VahlexFr.)Quel.）与乌天麻共生菌种的培育及菌棒加工，不适用于带菌、退化菌种及不合格原料的制备作业。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本规程必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本规程；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本规程。

GB/T1.1—2020标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则

NY/T2102—2011药用植物种质资源保存规范

NY/T1738—2009天麻栽培技术规程

GB/T27728—2011微生物菌种保存技术规范

HJ588—2010农业固体废物污染控制技术导则

GB/T6682—2008分析实验室用水规格和试验方法

NY/T496—2021肥料合理使用准则通则

3术语和定义

下列术语和定义适用于本规程，未定义的术语参照NY/T1738及相关行业标准执行。

3.1乌天麻菌种

用于乌天麻栽培，能与乌天麻块茎形成共生关系的蜜环菌菌种，按培育阶段分为母种、原种和栽培种，具有菌丝洁白、粗壮、活力强，无杂菌污染，能快速侵染木材形成菌棒的特性。

3.2母种

从野生或人工栽培的优质蜜环菌子实体、菌索中分离纯化获得的原始菌种，用于原种培育，纯度高、活力强，是菌种繁育的基础。

3.3原种

以母种为基础，接种到适宜的培养基上扩大培育而成的菌种，用于栽培种培育，菌丝量大、适应性强，能快速适应菌棒培育环境。

3.4栽培种

以原种为基础，接种到菌棒原料（木材、辅料等）中培育而成的菌种，直接用于乌天麻栽培菌棒的制备，能快速侵染木材，形成稳定的共生菌索。

3.5菌棒

以阔叶树木材为主要原料，添加适量辅料，接种乌天麻栽培种后，经培养使蜜环菌菌丝充分侵染木材形成的菌材，是乌天麻块茎生长的营养来源。

3.6菌索

蜜环菌的营养菌丝聚集形成的绳索状结构，颜色呈棕褐色或黑色，坚韧有弹性，能穿透木材组织，吸收和运输营养，是乌天麻与蜜环菌共生的主要连接结构。

3.7无菌操作

在菌种分离、接种、培养等过程中，采用消毒、灭菌等措施，避免杂菌污染，确保菌种纯度和活力的操作规范。

4总则

4.1指导原则

安全性原则：严格控制菌种和菌棒制备全过程的无菌环境、原料质量及操作规范，避免杂菌污染，确保菌种和菌棒安全可用，操作人员安全得到保障。

稳定性原则：优化菌种分离、培育及菌棒制备参数，确保菌种活力稳定、菌棒侵染均匀，与乌天麻共生性好，提升乌天麻栽培成活率和产量。

科学性原则：遵循蜜环菌生长繁殖规律及乌天麻共生特性，选用适宜的培养基、原料和培育条件，确保技术操作科学、可重复、可推广。

环保性原则：妥善处理制备过程中产生的废弃原料、杂菌培养基、废弃菌棒等，减少环境污染，符合HJ588及相关环保标准，实现资源循环利用。

标准化原则：菌种制备、菌棒加工、质量检测、包装储存等各环节严格遵循本规程及相关标准，确保菌种和菌棒质量稳定可控。

4.2技术目标

菌种目标：母种纯度100%、菌丝长满培养基时间7～10天；原种无杂菌污染、菌丝长满培养基时间20～25天；栽培种菌丝活力强、侵染速度快，菌索发达。

菌棒目标：菌棒无杂菌污染，蜜环菌菌丝侵染均匀，菌索发达，木质部质地疏松，含水量适宜（45%～55%），接种乌天麻后共生成活率≥90%。

质量目标：菌种和菌棒符合相关标准，无霉变、无虫蛀、无异味，能满足乌天麻规模化栽培需求，保障乌天麻品质和产量。

安全目标：全程无杂菌污染、试剂泄漏等安全问题，实验废弃物处理达标，操作人员安全得到保障。

5材料与设备准备

5.1材料要求

5.1.1菌种分离材料

蜜环菌来源：选用野生或人工栽培的优质蜜环菌子实体（菌盖肥厚、颜色金黄、无霉变、无虫蛀）或菌索（棕褐色、坚韧有弹性、无杂菌），优先选用与乌天麻共生性强的蜜环菌株。

分离基质：马铃薯、葡萄糖、琼脂、磷酸二氢钾、硫酸镁等，均为分析纯，配制用水符合GB/T6682一级水要求，用于母种分离培养基制备。

5.1.2菌种培育材料

母种培养基原料：马铃薯（新鲜、无霉变、无发芽）、葡萄糖、琼脂、磷酸二氢钾（分析纯）、硫酸镁（分析纯）、维生素B1（分析纯），配制用水为无菌水。

原种培养基原料：阔叶树木屑（桦树、栎树、枫树等，粉碎后粒径0