耐低温耐酒精白葡萄酒酵母选育研究.pdfVIP

耐低温耐白葡萄酒酵母的选育

，，，尹吉泰

(中法合营葡萄酿酒，300402)

：本文通过对白葡萄酒酵-~-R2进行紫外线诱变的方法进行定向选育和驯化，筛选出耐低温菌株，

再与耐酵母进行有性杂交，筛选出在保持原有发酵性能的条件下具备耐低温耐的特性的菌株。

葡萄酒酵母在葡萄酒发酵过1．2．2紫外线诱变处理取3mL②CO，失测定菌株发酵

着非常重要的作用，它将菌液于~75mm培养皿中，将培养性能：以CO，产生量为纵坐标，

葡萄汁中的绝大部分糖转化为酒皿放人紫外线诱变箱的磁力搅拌发酵时间为横坐标，绘制CO，产

精和二氧化碳，同时生成甘油、高器上。开启紫外灯，预热20min生量曲线。

级醇、酯、醛等代谢产物，直接影后，开启磁力搅拌器，打开皿盖，1．2．6有性杂交

响了葡萄酒的色泽、香气及口感，照射一定时间，使细胞存活率在①出发菌株R2—10呼吸

决定着葡萄酒的质量。而对于白1％～30％。型突变体的。

葡萄酒来讲，只有在较低温度下1．2．3初筛将培养后的菌液稀释②取葡萄酒酿酒酵母Q23的

发酵才能保持原葡萄品种的果香，成10一、10一、⋯⋯，取0．1mL涂单倍体细胞，通过紫外线诱变筛

减少杂菌机率。这就要求选布于葡萄汁琼脂平板上(每一个选氨基酸营养型细胞。

用能耐低温，在酒度较高的条件稀释度为3皿，每皿菌落不超过30③将两种获得遗传标记的单

下仍具有较高活性的葡萄酒酵母。个为宜)，13℃培养3天，观察菌倍体细胞菌悬液各取0．5mL按1：1

1材料与方法落生长情况。混合，分别接种于5mL完全培养基

1．1试验材料1．2．4复筛融化TTC上层培养中，28℃培养6～8h，显微镜下观

1．1．1菌种：葡萄酒酵母R2基冷至45℃，轻轻由平皿一边注察哑铃状接合子生成，将菌液涂

酿酒酵母Q23(耐能力入已培养好的平板上，要求将底布于基本培养基上，15℃培养2～

强)层培养物全部覆盖，然后置30~C4天，观察孢子及菌落生长情况。

1．1．2培养基：①YEPD培养基；保温2—3小时，取出，迅速比较菌1．2．7发酵性能测定1000mL的

②YPG培养基；③TTC琼脂平板落颜色，将红色菌落转接于麦芽三角瓶中，以10％的接种量接入

培养基；④麦芽汁培养基；⑤有汁琼脂培养基斜面，25℃培养48杂交筛选所得酵母菌株，18℃保

性杂交培养基