金属-DNA自组装纳米体系的构建及肿瘤治疗.pdfVIP

摘要

癌症已成为严重威胁人类健康的主要疾病之一。DNA自组装纳米材料具有

良好的生物相容性、较低的细胞毒性、可修饰性以及特异性识别等优势，已被

广泛应用于肿瘤标志物检测与治疗。本论文通过使用炔基和叠氮修饰的DNA

和金属Cu（I）离子，构建了金属-DNA自组装纳米材料。该方法解决了传统金

属-DNA纳米材料在PBS（pH=7.2）中稳定性较差的问题，并开展了肿瘤靶向

治疗的研究，具体内容包括：

（1）由于不同碱基与金属Cu（I）离子铜的结合力不同，选取了不同序列

的DNA与金属Cu（I）离子进行自组装。结果表明，G20和T20序列的DNA

与金属Cu（I）离子自组装得到了形貌规则且均一的Cu-DNA自组装纳米材料

（CDN）。为测试其稳定性，将CDN置于PBS（pH=7.2）中，1分钟时该纳

米颗粒形貌开始变形，边缘模糊，4分钟时开始裂解，10分钟时完全裂解。为

了改进CDN的稳定性，我们选择在两条DNA的一端各修饰炔基和叠氮基团，

通过点击反应与配位作用进行自组装得到Cu-DNA纳米材料（CDCN）。结果

表明，CDCN在PBS（pH=7.2）4小时中仍能够稳定存在且形貌规则边缘清

晰。这是由于在铜离子的存在下，叠氮与炔基进行点击反应，生成的1，2，3-

三氮唑直接与作为催化剂的金属Cu（I）离子进行配位，且配位作用力比磷酸

基团更强。点击反应和配位作用显著提高了传统金属-DNA纳米材料的稳定

性，简化了合成方法，为金属-DNA纳米材料在生物化学领域奠定了基础。

（2）核酸适配体靶向主要基于核酸适配体对靶分子的高特异性识别和紧密

结合能力。为提高CDCN的抗肿瘤效果，同时加强金属离子与DNA的作用

力，以4T1乳腺肿瘤细胞的适配体为DNA序列（其中G碱基与T碱基在整条

DNA链中共占比74.86%），构建具有靶向效果的CDCN-4T1。CDCN-4T1能

够在PBS（pH=7.2）中能够稳定存在。细胞实验表明，相较于A549细胞和

LO2细胞，4T1细胞内荧光强度更亮，表明CDCN-4T1对4T1细胞具有明显的

靶向作用。铜离子能够触发芬顿反应产生对细胞有毒性的活性氧（ROS），起

到化学动力学治疗的效果。基于此，构建了小鼠乳腺癌肿瘤模型，通过静脉注

射CDCN-4T1可有效靶向到小鼠肿瘤部位，并呈现良好的CDT治疗效果。线

粒体成像证实了铜依赖的免疫原性细胞死亡。同时，CDCN-4T1也表现出优异

万方数据

的磁共振成像能力，尾静脉注射2小时后，与对照组相比，注射组小鼠肿瘤部

位明显。这种由配位作用与点击化学相结合的金属-DNA自组装纳米颗粒的方

法将推动DNA纳米技术在肿瘤诊断和治疗领域的发展。

关键词：点击化学；配位自组装；Cu-DNA纳米颗粒；肿瘤治疗

Abstract

Cancerhasbecomeoneofthemajordiseasesthatseriouslythreatenhuman

health.DNA-self-assemblednanoparticleshavebeenwidelyusedinthedete