2026《金版教程》高考复习方案生物创新多选版-小单元3 第37讲 基因工程的基本工具和基本操作程序.docxVIP

小单元3基因工程及生物技术的安全性和伦理问题

第37讲基因工程的基本工具和基本操作程序

1.概述基因工程是在遗传学、微生物学、生物化学和分子生物学等学科基础上发展而来的。2.阐明DNA重组技术的实现需要利用限制性内切核酸酶、DNA连接酶和载体三种基本工具。3.阐明基因工程的基本操作程序主要包括目的基因的获取、基因表达载体的构建、目的基因导入受体细胞和目的基因及其表达产物的检测鉴定等步骤。4.DNA的粗提取与鉴定。5.DNA片段的扩增及电泳鉴定。

1．(2023·重庆，12)某小组通过PCR[假设引物长度为8个碱基(短于实际长度)]获得了含有目的基因的DNA片段，并用限制酶进行酶切(如图)，再用所得片段成功构建了基因表达载体。下列叙述错误的是()

A．其中一个引物序列为5′－TGCGCAGT－3′

B．步骤①所用的酶是SpeⅠ和CfoⅠ

C．用步骤①的酶对载体进行酶切，至少获得了2个片段

D．酶切片段和载体连接时，可使用E.coliDNA连接酶或T4DNA连接酶

答案：B

解析：由于引物只能引导子链从5′到3′合成，分析图中扩增获得的DNA片段可知，其中一个引物序列为5′－TGCGCAGT－3′，A正确；根据三种限制酶的识别序列和酶切后的DNA片段两侧的黏性末端可知，步骤①所用的酶是NheⅠ和CfoⅠ，B错误；用步骤①的两种酶对载体进行酶切，至少切断2处，切割之后至少获