动物细胞重组技术概论与应用.pptxVIP

细胞工程;第七章动物细胞重组技术与克隆技术;第一节细胞重组技术的概论;1.2.3亲本细胞

4.6核体

5.7胞质体

8杂交细胞

9核杂种细胞

10重组细胞

11胞质杂种细胞

ⅠPEG介导的细胞融合技术

Ⅱ培养基筛选

;几个重要的概念;二.细胞重组的基本方式

一般而言，细胞重组的方式基本分为以下三种

胞质体与完整细胞重组形成胞质杂种细胞

胞质体与核体重新组合形成重组细胞

微细胞（微核体）与完整细胞重组形成微细胞异核体

其中，第2种方式是最为重要的细胞重组技术

三.细胞重组的技术基础

细胞操作技术（细胞分离技术1；细胞核质分离技术2）

动物细胞融合技术3（有膜细胞成分的融合重组）

显微操作技术4（细胞内物质的抽取和移植；物质向细胞的注入）

;1.细胞分离技术;原理

操作时，先配制一定浓度的梯度介质，然后加入细胞溶液中，在选定得离心力作用下，不同密度的细胞处于离心介质的密度范围内或向下沉降，或向上漂浮，当移动至其密度与介质密度相等的位置（等密度点）便不再移动，形成静止区带，即达到离心平衡，各组分按密度不同处于区带的不同位置，然后，这些不同位置的细胞分开收集，就能达到彼此分离的目的离心技术。

密度梯度介质

梯度介质具有足够大的溶解度，以形成所需的密度浓度范围；不会与样品中的组分发生反应；也不会引起样品中组分的凝集、变形或失活。