随堂感悟：通过异核体细胞研究目标蛋白定位.pdfVIP

随堂感悟15

：学号日期：2014/6/3

本次thinkingTesting题目大意如下：你的导师在例会上讲述了他的实验结

果，他用GFP标记目标蛋白，而且观察得这种目标蛋白定位于细胞核内，但是他不知道如

何进一步确定目标蛋白是核内蛋白，还是大部分时间存在于核内的穿梭蛋白，但是用细霉素

B是没有用的，于是他让大家各抒己见。你刚好看过一篇文献，其中解决了类似的问题，所

以你提议用表达目标蛋白的细胞与过量不表达目标蛋白的细胞进行融合形成异核体细胞，在

蛋白质合成抑制剂的作用下，蛋白质合成过程将会被阻断，所以通过检测异核体细胞就可以

解决这个问题了。当你的导师问你为什么的时候，你回答：想。

题目中提到的细霉素B在上一节课的思考题中出现过，我们知道细霉素B通过抑制Crm1

而穿梭蛋白出核过程，所以如果用细霉素B处理细胞，即使是穿梭蛋白，其结果也会被

限制在细胞核，与细胞白是无法区分开的。至于为何要用过量不表达目标蛋白的细

胞与表达目标蛋白的细胞融合，我认为是因为使融合的两方其中一方过量会促进融合的效率，

促使的融合细胞产生