实验一-蛋白质的定量测定-Lowry法.ppt

一、实验目的

1、熟悉改良Lowry法测定血清蛋白质含量的原理。

2、掌握直接比色法和标准曲线法的应用。

3、熟悉分光光度计的使用。

二、实验原理

考马斯亮蓝法

Lowry法

紫外分光光度法

二、实验原理

蛋白质

紫红色蛋白质-铜的络合物

碱性铜试剂

酚试剂

蓝紫色溶液

肽键

酪氨酸、色氨酸等氨基酸残基

直接比色法

标准曲线法

A=KLC

三、实验步骤

试剂（ml）

1

2

3

4

5

6

测

定

管

标

准

管

空

白

管

标准蛋白溶液

（250μg/ml）

-

0.2

0.4

0.6

0.8

1.0

稀释血清1.0

-

0.4

-

0.9%NaCl

1.0

0.8

0.6

0.4

0.2

-

0.6

1.0

碱性铜试剂

5.0

5.0

5.0

5.0

5.0

5.0

5.0

5.0

5.0

混匀，37℃保温20分钟

酚试剂

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

混匀，37℃保温30分钟

四、结果与分析

血清蛋白质含量的计算

标准曲线法：绘制标准曲线，根据标准曲线求得血清

中蛋白质的含量

直接比色法：根据标准管吸光度值计算血清中蛋白质

的含量

谢谢大家！

ThankYou！