2025高考生物复习：基因工程的基本工具和基本操作程序.docxVIP

1、基因工程的基本工具

【例1】用DNA重组技术可以赋予生物新的遗传特性，在此过程中需要使用多种工具酶，其中3种限制酶的切割位点如图所示。下列叙述错误的是（????）

A．限制酶和DNA连接酶作用的均是脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键

B．EcoRI酶切割后的DNA片段可以用T4DNA连接酶连接

C．EcoRV酶切割后的DNA片段可以用E．coliDNA连接酶连接

D．经EcoRI酶和MunI酶切割后产生的两个DNA片段可进行连接

【答案】C

【分析】E.coliDNA连接酶只能连接黏性末端；T4DNA连接酶既可连接平末端，又可连接黏性末端。

【详解】A、限制酶能切开磷酸二酯键，DNA连接酶是催化DNA片段的连接，形成的是磷酸二酯键，A正确；

B、EcoRI酶切割后的DNA片段为黏性末端，可用T4DNA连接酶连接，B正确；

C、EcoRV切出的为平末端，应用T4DNA连接酶连接，C错误；

D、经EcoRI酶和MunI酶切割后产生的末端相同，因此两个DNA片段可进行连接，D正确。

故选C。

【变式1-1】在DNA体外重组实验中，抗药性筛选法是一种常见的基因表达载体筛选方法，该方法实施的前提条件是载体DNA上携带特定的抗性基因。利用某外源DNA和pBR322质粒构建基因表达载体，然后导入大肠杆菌中，并进行筛选和鉴定，部分过程如图所示，其中AmpR表示氨苄青霉素抗性基因，TetR表示四环素抗性