醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白.pptVIP

（优选）醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白;血清中含有清蛋白，α-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白和各种脂蛋白等。各种蛋白质由于氨基酸组分、立体构象、分子量、等电点及形状不同，在电场中迁移速度不同。分子量小、等电点低、在相同碱性PH值缓冲体系中，带负荷电荷多的蛋白质颗粒在电场中迁移速度快。

例如，以醋酸纤维素薄膜为支持物，正常人血清在PH8.6的缓冲体系中电泳1h左右，染色后可显示5条区带。清蛋白泳动最快，其余依次为α1-、α2-、β-及γ-球蛋白（如图3-5）。;图3-5正常人血清醋酸纤维素薄膜电泳示意图

1为清蛋白，2，3，4，5分别α1-，α2-，β-及

γ-球蛋白，6为点样原点;这些区带经洗脱后可用分光光度法定量，也可直接进行光吸收扫描自动绘出区带吸收峰及相对百分比。

此法由于操作简单，快速，分辨率高及重复性好等优点。它不仅可用于分离血清蛋白，还可用于分离脂蛋白、血红蛋白及同工酶的分离测定。

;【实验材料】

1．电泳仪包括直流电源整流器和电泳槽两个部分。

2．醋酸纤维素薄膜。

;⑵试剂;③透明液：临用前配制。

甲液：取冰乙酸（AR）15mL，无水乙醇（AR）85mL，混匀置试剂瓶内，塞紧瓶塞，备用。

乙液：取冰乙酸（AR）25mL，无水乙醇（AR）75mL，混匀置试剂瓶内，塞紧瓶塞，备用。

④保存液：液体石蜡。

⑤定量洗脱液（0.4mol