基因工程和细胞工程知识整合提醒.docxVIP

知识整合

1.理清基因工程的3种操作工具

提醒

(1)一般用同种限制酶切割载体和目的基因，不同的限制酶也能切割出相同的黏性末端。

(2)双酶法可以使目的基因与载体定向连接，防止目的基因和载体的自身环化以及二者反向连接。

2．掌握基因工程的操作步骤

提醒

1．澄清基因工程的4个“≠”

(1)DNA连接酶≠DNA聚合酶：DNA连接酶连接两个DNA片段，而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸添加到脱氧核苷酸链上。

(2)限制酶≠DNA酶≠解旋酶：限制酶切割某种特定的脱氧核苷酸序列，并使两条链在特定的位置断开；DNA酶可将DNA水解为其基本组成单位；解旋酶将DNA的两条链间的氢键打开形成两条单链。

(3)启动子≠起始密码子，终止子≠终止密码子

起始密码子和终止密码子位于mRNA上，分别控制翻译过程的启动和终止；启动子和终止子位于DNA上，分别控制转录的启动和终止。

(4)基因治疗≠基因诊断

①基因治疗：将正常基因导入有基因缺陷的细胞中，使该基因的表达产物发挥功能，以达到治疗的目的——其原理为基因重组及基因表达。

②基因诊断：制作特定DNA探针与病人样品DNA混合，分析杂交带情况——其原理为DNA分子杂交。

2．辨析农杆菌转化法中的“两个两次”

(1)两次拼接：第一次拼接是将目的基因拼接到Ti质粒的T－DNA的中间部位；第二次拼接指被插入目的基因的T－DNA被拼接到受体细胞染色体的DNA上