深度解析核心技术精讲稿.pptxVIP

原理修改稿级用此稿讲;PCR得过程分如下三步循环反应:

1、变性通过加热90～95℃变性使DNA双螺旋得氢键断裂,双链解离形成单链DNA。

2、退火当温度降低550C时,因为引物量大大多于模板DNA,几乎所有得单链DNA模板均与引物在互补区形成杂交链。

3、延伸在约700C条件下,DNA聚合酶以dNTP为原料,以两条引物为复制得起点,在两条模板链上合成新得DNA子链。

;如此重复变化反应温度,即高温变性、低温退火和中性延伸三个阶段。

PCR技术得特异性取决于引物和模板DNA结合得特异性。

;反应过程三步反应得循环;2、退火(复性)

当温度降低约55℃时两条引物链在低

温下分别于两条模板互补,因为引物DNA

量大大多于模板DNA,几乎所有得单链

DNA模板均与引物在互补区(形成局部双

链)形成杂交链。

;3、延伸

升高温度至70~72℃,此时DNA聚

合酶以4种dNTP为原料,以两引物为复制得起点,在两条模板上合成新得DNA子链。;以三次变化温度为一种循环,每一次循环就就是