基因工程药物制造实例.pptVIP

第十三节基因工程药物制造实例;干扰素是人体防御系统的重要组成部分。根据分子结构和抗原性的差异分为α、β、γ、ω等4个类型。α型干扰素在分为α1b、α2a、α2b等亚型，其区别仅表现为个别氨基酸。

是我国已经批准上市的基因工程药物。

早期获得方法：用病毒诱导人白血球(白细胞)产生，产量低，价格贵。300L人血才提取1mg。;2003年抗非典期间，江南大学与丽珠集团苏州新宝制药厂合作攻关，通过发酵工程和生物制药工程研制成功了重组人α-2b干扰素口鼻腔喷雾剂，解决了干扰素常温保存稳定性问题。在疫区特殊人群捐赠使用，效果显著。;;;二、基因工程干扰素的制备;α2b干扰素生产过程

1.发酵

工程菌：SW-IFNα-2b/E.coliDH5α，质粒用PL启动子，含氨苄青霉素抗性基因。种子培养基含1%蛋白胨0.5%酵母提取物0.5%NaCl。制备种子液作为发酵罐种子使用。;发酵培养基：1%蛋白胨，0.5%酵母提取物，0.05%NaCl，0.01%NH4Cl等。发酵培养基加入氨苄青霉素，防泡剂。30℃发酵8h，然后在42℃诱导2-3h可完成发酵。每隔不同的时间取发酵液，离心称量湿菌体。;2.产品的提取与纯化

a冷却后离心，除上清液，得湿菌体悬浮于缓冲液中，冰浴条件下超声破碎；

b离心，取沉淀部分；加尿素、缓冲液和二巯基苏