实验2蛋白质的性质实验.ppt

实验2.蛋白质性质实验;一、蛋白质等电点的测定;实验原理;调节氨基酸溶液的pH，使氨基酸分子上的—+NH3基和—COO-基的解离程度完全相等时，即所带净电荷为零，此时氨基酸所处溶液的pH值称为该氨基酸的等电点（pI）。;蛋白质是两性电解质。在蛋白质溶液中存在下列平衡;蛋白质分子的解离状态和解离程度受溶液的酸碱度的影响。当溶液的pH达到一定数值时，蛋白质颗粒上正负电荷的数目相等，在电场中，蛋白质既不向阴极移动，也不向阳极移动，此时溶液的pH值称为此种蛋白质的等电点PI。不同蛋白质各有其特异的等电点。在等电点时，蛋白质的理化性质都有变化，可利用此种性质的变化测定各种蛋白质的等电点。最常用的方法是测其溶解度最低时的溶液pH值。本实验借观察在不同pH值溶液中的溶解度以测定酪蛋白的等电点。;（三）蛋白质的沉淀类型：

1.可逆沉淀：此时蛋白质分子的结构尚未发生显著变化，除去引起沉淀的因素后，蛋白质的沉淀仍能溶解于原来的溶剂中，并保持其天然性质而不变性。

2.不可逆沉淀：此时蛋白质分子内部结构发生重大改变，蛋白质常变性而沉淀，不再溶于原来溶剂中。

蛋白质变性后，有时由于维持溶液稳定的条件仍然存在（如电荷），蛋白质并不析出。因此变性蛋白质并不一定都表现为沉淀，而沉淀的蛋白质也未必都已变性。

;几种沉淀蛋白质的方法;酪蛋白等电点测定;乙醇引起的变性与沉