基因工程技术核心操作流程详解.pptxVIP

基因工程的基本操作程序;;基因工程的基本操作程序;一、目标基因的获取;（一）从基因文库中获取目标基因;基因组DNA文库;;①不能转录为信使RNA，不能

编码蛋白质。;;真核细胞的基因结构;;;基因组文库与部分基因文库的关系;基因组文库和部分基因文库的比较;2.基因文库的构建方法;（1）鸟枪法：;以目标基因转录成的信使RNA为模板，再反转录酶的催化下反转录成互补的单链DNA，然后在DNA聚合酶的作用下合成双链DNA，即cDNA，从而获得所需的基因。

;（3）人工合成法：;上述三种目标基因提取的方法有何优缺点？;思考：

怎样从基因文库中得到所需要的基因？;1、构建基因组DNA文库时，首先应分离细胞的

A、染色体DNA??B、线粒体DNA

C、总mRNA??D、tRNA;（2）利用PCR技术扩增目标基因;（二）利用PCR技术扩增目标基因;模板DNA;;;;;;过程：;第31页;请回答基因工程方面的相关问题：?

(1)利用PCR技术扩增目标基因，其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。?

①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的百分比为_______。?

②在第_______轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。;;①概念：PCR全称为_____