实时荧光定量PCR仪操作规范
一、操作前准备
1.人员资质要求
所有操作人员必须经过实时荧光定量PCR(qPCR)原理、仪器操作、污染防控、生物安全专项培训并考核合格,熟悉所用仪器的性能参数、操作流程及应急处理方案,未通过考核人员不得独立操作仪器。涉及病原微生物样本检测的操作人员,需取得对应生物安全等级的操作资质。
2.试剂准备
所有qPCR试剂需严格按照说明书要求储存,探针法试剂全程避光,避免反复冻融,首次使用时需按单次使用量分装,冻存于-20℃冰箱,避免反复冻融导致酶失活、探针降解。使用前试剂置于冰上融化,融化后涡旋振荡3s,1000g离心30s去除气泡。
引物、探针使用前需完成有效性
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