基因工程技术在生物科学中的应用.pptxVIP

第十七章重组DNA技术与基因组学

第一节DNA序列测定第二节重组DNA技术的基本操作原理第三节重组DNA技术的应用第四节基因组学和蛋白组学及研究技术介绍第1页

DNA测序的基本方略

设法产生带标识的不同长度的成套DNA片段，各带有标识的片段起点相似、终点不同，使待测的DNA链中的相应每个核苷酸处均有断裂或终止。通过PAGE电泳，能够将相差一种核苷酸的DNA片段分开，放射自显影后，依据长短排列，依据特定末端碱基的DNA片段就可读出待测DNA的碱基序列。?双脱氧末端终止法?化学法?测序技术进展+-?????Mark???????第2页

DNA测序的基本方略

设法产生带标识的不同长度的成套DNA片段，各带有标识的片段起点相似、终点不同，使待测的DNA链中的相应每个核苷酸处均有断裂或终止。通过高辨别率的电泳，能够将相差一种核苷酸的DNA片段分开，依据DNA片段长短排列次序及其末端碱基就可读出待测DNA的碱基序列。?双脱氧末端终止法?化学法?测序技术进展+-?????Mark???????有相似的起点,不同终点的一套DNA片段示意图电泳图谱第3页

双脱氧末端终止法测序原理酶反应电泳方向模板CCGGTAGCAACT3′5′GG5′3′引物dATPdCTPdGTPdTTP+ddATPdATPdCTPdGTPd