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- 2026-06-10 发布于四川
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;1.PCR技术及其应用
(1)PCR技术与病毒检测
某些病毒感染的常规检测方法是通过实时
荧光PCR鉴定。实时荧光PCR扩增目的基因,需
额外添加荧光标记探针(一小段单链DNA,可与
目的基因中部分序列特异性结合)。当探针完整时,不产生荧光。在PCR过程中,与目的基因结合的探针被TaqDNA聚合酶分解,R与Q分离后,R发出的荧光可被检测到(如图甲),通过实时荧光PCR检测这些病毒感染时,检测到的荧光强度变化如图乙。;(2)基因定点突变与基因改造
重叠延伸PCR技术是一项重要的基因定点突变技术,
其主要设计思路是用具有互补配对片段的引物(图中的引物
2和3,突起处代表与模板链不能互补的突变位点)分别进行
PCR,获得有重叠链的两种DNA片段,再在随后的扩增反
应中通过重叠链的延伸获得想要的目的基因。水蛭素是一种蛋白质,可用于预防和治疗血栓。某科研团队运用重叠延伸PCR技术在水蛭素基因中的特定位点引入特定突变,使水蛭素第47位的天冬酰胺(密码子为AAC、AAU)替换为赖氨酸(密码子为AAA、AAG),从而提高水蛭素的抗凝血活性。原理如图。;2.基因编辑技术及其应用
CRISPR/Cas9基因编辑技术能对基因进行定点编辑,
其原理是由一条单链向导RNA(SgRNA)引导内切核酸酶
Cas9到一个特定的基因位点进行切割(如图)。
CRISPR复合体中的SgRN
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