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培养基制备指导书

一、培养基制备的前期准备

（一）环境与设备要求

培养基制备应在专用的无菌室或洁净区域内进行，环境需满足万级洁净度标准，且配备有效的空气净化系统，确保空气流动方向为单向流，避免交叉污染。操作前需对环境进行紫外线消毒30分钟以上，消毒后间隔15分钟方可进入操作。

制备过程中所需的设备包括：电子天平（精度达0.01g）、pH计（精度±0.01）、高压蒸汽灭菌器、超净工作台、恒温水浴锅、磁力搅拌器、移液器（量程涵盖1μL-10mL）等。所有设备需定期校准，校准记录保存期限不少于2年。电子天平需每年由专业机构进行计量检定，pH计每次使用前需用标准缓冲液（pH4.00、pH6.86、pH9.18）进行两点校准。

（二）试剂与耗材准备

培养基制备所用试剂应选用分析纯或生化纯级别，且在有效期内。购买的试剂需检查包装完整性，无破损、无泄漏，标签信息清晰可辨，包括试剂名称、纯度、生产日期、有效期、生产厂家等。对于易潮解、易氧化的试剂，如琼脂、明胶等，需采用密封干燥保存，存放于干燥器内，避免影响试剂质量。

耗材主要包括：玻璃器皿（锥形瓶、烧杯、量筒、容量瓶等）、一次性无菌过滤器（0.22μm孔径）、无菌移液管、无菌离心管等。玻璃器皿使用前需进行清洗，先用自来水冲洗去除残留杂质，再用铬酸洗液浸泡24小时，之后用自来水冲洗至无残留洗液，最后用蒸馏水冲洗3次以上，晾干后进行干热灭菌（16