第四章基因工程的主要技术及其原理讲课文档.ppt

第四章基因工程的主要技术及其原理;凝胶电泳;猪基因组DNA及PCR产物

电泳仪，电泳槽，电子天平，移液器，枪头，

微波炉，紫外透射检测仪等。

琼脂糖，1XTAE电泳缓冲液，溴化乙锭（EB），6X载样缓冲液：Ⅰ0.25%溴酚蓝，0.25%二甲苯青，40%蔗糖水溶液;Ⅱ0.25%溴酚蓝，0.25%二甲苯青，30%甘油水溶液

;相关知识：

①影响琼脂糖凝胶DNA迁移速率的因素、迁移速率由DNA的分子大小、琼脂糖浓度、DNA的构象、所加电压、电场方向、碱基组成与温度、嵌入染料的存在、电泳缓冲液的组成等许多参数确定。;实验步骤;;结果与分析;结果与分析;琼脂糖凝胶电泳装置;实验步骤;;;;;;;第十七页，共145页。;第十八页，共145页。;电泳结果分析;脉冲电场（PFGE）解决大分子DNA电泳问题;第二十一页，共145页。;Blotting;定义：;(1)Southern印迹杂交法;SouthernBlotPartI:Gelelectrophoresisfollowedbytransfertoamembrane;SouthernBlotPartII:HgybridizationofDNAonmembranetospecificprobe;第二十七页，共145页。;DNA