第二章基因工程制药2讲课文档.ppt

第二章基因工程制药;优选第二章基因工程制药;1、基因表达

是指结构基因在生物体中的转录、翻译以及所有加工过程。

2、宿主细胞的分类：

①原核细胞，常用的有大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、链霉菌等；

②真核细胞，常用的有酵母、丝状真菌、哺乳动物细胞。;3、提高外源基因在E.coli表达效率：

（1）外源基因的剂量

（2）外源基因的表达效率

（3）表达产物的稳定性

（4）细胞的代谢负荷

（5）工程菌的培养条件

;4、真核基因在大肠杆菌中的表达形式:

⑴以融合蛋白的形式表达药物基因

⑵以非融合蛋白的形式表达药物基因

⑶分泌型表达药物基因

;5、质粒的不稳定性

分裂不稳定：指工程菌分裂时出现一定比例不含质粒子代菌的现象。

结构不稳定：指外源基因从质粒上丢失或碱基重排、缺失所致工程菌性能的改变。;6、提高质粒稳定性的方法;第六节基因工程药物的分离纯化;(3)目的产物的稳定性差，具有生物活性的物质对pH、温度、金属离子、有机溶剂、剪切力、表面张力等十分敏感，容易是其失活、变性；

种类繁多，包括大、中、小分子、结构简单或复杂的有机化合物，以及结构复杂又性质各异的生物活性物质；

应用面广，对其质量、纯度要求高，甚至要求无菌、无热源。;一、建立分离纯化工艺的根据;一、建立分离纯化工艺的根据;一、建立分离纯化工艺的根据;一、建立分离纯化工艺的根据;一、建立分离纯化工艺的根据;