蛋白酶测定方法完整实用指南.pdfVIP

蛋白酶活性测定方法

一蛋白酶活力单位定义

L第二步混匀水解min加入三氯乙酸终止液mLmL第一步混匀静止分钟过滤总体积mLmL滤液用紫外分光光度计在nm波长下用mm比色皿测定其吸光度A计算XAKnEAKnEm式中X样品的酶活力ugumLA试样溶液的平均吸光度K吸光常数反应试剂的总体

1g固体酶粉(或1mL液体酶)，在一定温度和pH值条件下，1min水解酪素产

生1μg酪氨酸为一个活力单位，以u/g(u/mL)表示。

二测定原理

蛋白酶在一定的温度与pH条件下，水解酪素底物，然后加人三氯乙酸终止酶

反应，并使未水解的酪素沉淀除去，滤液对紫外光有吸收，可用紫外分光光度法测

定。根据吸光度计算其酶活力。

三应用范围

的试剂lgmLL酪氨酸标准溶液a称取预先于干燥至恒重的L酪氨酸g精确至g用molL盐酸mL溶解后定容至mL即为mgmL酪氨酸标准溶液注L酪氨酸采用上侮长江化制药厂产品b吸取mgmL酪氨酸标准溶液mL用lmolL盐酸定容至mL即得到gmLL酪

本法适用于各种含有酸性蛋白酶的复合酶和液体酶及单酶的测定。

四测定条件

4.1