医学课件DNA重组和基因转移.pptVIP

第七章DNA重组和基因转移;第一节目的基因与载体的连接;（二）具有不同粘性末端的DNA;HindIIIEcoRIHin;二、平末端DNA片段的连接1、;2、同聚物加尾法峡吻腰侨鸵梨肪;3、衔接物连接法衔接物是指用化;三、载体与DNA片段酶切位点不;3、使用大肠杆菌DNA聚合酶I;四、cDNA与载体的连接通过依;第二节重组DNA分子的筛选;一、遗传检测法（一）根据载体表;插入失活法筛选重组子侮狭这老灵;2、α—互补例；pUC质粒;二、物理检测法1、凝胶电泳检;2、R-环法在临近双链DNA;三、核酸杂交检测法例：原位杂;四、免疫化学检测法免疫化学检;用免疫化学法检测克隆在表达载体;五、DNA-蛋白质筛选法六、;1．杂交抑制转译要求：被研究;2、杂交选择转译观察到在这种;第三节基因转移方法一、;（1）吸附阶段：完整的双链DN;（二）转染（2）λ噬菌体的体外;λ噬菌体的体外包装的原理：根据;二、重组DNA导入植物细胞的方;①从烟草无菌苗中分离原生质体，;（2）叶盘共培养法图该方法最;（3）悬浮细胞或愈伤组织共培养;2、病毒介导的基因转移（1）;（二）DNA直接导入法1、物;基因枪示意图棚泅菠屡避闸蚜剁缕;基因枪所用材料：（1）钨粉使用;（2）电激法(electrop;操作程序：将盛有细胞和DNA混;（3）微注射法（micro-i;（4）激光微束法