2027创新设计一轮生物 高考共鸣点14　基因敲除及同源重组、融合基因与融合蛋白.pptxVIP

SHENGWUXUE;热点;;;1.同源重组构建表达载体

(1)减数分裂Ⅰ非姐妹染色单体的交换;(2)利用同源重组双交换

实现基因敲除;2.基因敲除技术——应用Cre－LoxP系统进行基因敲除

(1)Cre－loxP系统的组成;(2)Cre－loxP系统的作用方式;[例](2025·安徽卷，20)稻瘟病是一种真菌病害，水稻叶片某些内生放线菌对该致病菌有抑制作用。科研小组分离筛选出内生放线菌，并开展了相关研究。回答下列问题。

(1)采集有病斑的水稻叶片，经表面消毒、研磨处理，制备研磨液。此后，采用(填方法)将研磨液接种于不同的选择培养基，分别置于不同温度下培养，目的是___________________________________________。;(2)经筛选获得一株内生放线菌，该菌株高效合成铁载体小分子，能辅助内生放线菌吸收铁离子。R基因是合成铁载体的关键基因之一。科研小组构建R基因敲除株，探究铁载体的功能。主要步骤如下：首先克隆R基因的上游片段R－U和下游片段R－D；然后构建重组质粒；最后利用重组质粒和内生放线菌DNA片段中同源区段可发生交换的原理，对目标基因进行敲除。如图1所示。;采用PCR技术鉴定R基因的敲除结果。PCR通过变性、复性和延伸三步，反复循环，可实现基因片段的。R基因敲除过程中，可发生多种形式的同源区段交换，PCR