2027创新设计一轮生物 高考共鸣点13　特殊PCR技术、双标记基因技术、基因编辑技术.pptxVIP

特殊PCR技术、双标记基因技术、基因编辑技术;热点;;;题型一重叠延伸PCR技术;(1)以上操作中哪些引物应含有拟突变位点？

提示引物2和引物3。

(2)过程②和③，应分别选择哪些引物？

提示过程②时需选择引物1和引物2，过程③时需选择引物3和引物4。

(3)经过过程④获得的杂交DNA有2种，都可以经过过程⑤获得目的基因吗？;(4)为获得大量目的基因序列，应在突变后的基因中加入哪两种引物？

提示引物1和引物4。;拓展两个引物均从内部扩增，在某一引物引入突变位点;题型二大引物PCR技术

大引物PCR需要用到三条引物进行两轮PCR，这三条引物分别是突变上游引物、常规上游引物和常规下游引物。;题型三反向PCR扩增已知序列两侧的未知序列

反向PCR技术是根据DNA片段中间的已知序列设计引物，扩增已知序列两侧的未知序列的思路是：先从未知序列的两侧把DNA切成片段，然后通过DNA连接酶将DNA片段环化；再利用已知序列的两端设计引物，只不过引物相对于已知序列是反向配置的，所以子链反向延伸(如图)。;题型四巢式PCR

首先将目标的DNA模板与第一套引物(外引物)结合。第一套引物也可能结合到其他具有相似结合位点的片段上并扩增多种产物。但只有一种产物是目的片段(图中未显示可能的多种产物)。然后使用第二套引物(内引物)对第一轮PCR扩增的产物进行第二轮PCR扩增。由于第二套引物位于第