IPTG促进的外源蛋白高效表达研究.pptVIP

IPTG诱导的外源蛋白表示第1页

1.课题起源：试验环节：接种扩大培养IPTG诱导蛋白提取、纯化思考：IPTG（异丙基硫代半乳糖苷）的作用原理？第2页

2.IPTG的作用原理IPTG(isopropylthiog-alactoside,异丙基硫代半乳糖苷):化学合成的乳糖类似物，很强的β－半乳糖苷酶诱导剂，诱导乳糖操纵元(lacoperon)的开放，本身不被催化分解。类似的X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-半乳糖苷)也是一种人工化学合成的半乳糖苷，可被β－半乳糖苷酶水解产生兰色化合物，因此能够用作β－半乳糖苷酶活性的批示剂。IPTG和X-gal都被广泛应用在分子生物学和基因工程的工作中。第3页

2.IPTG的作用原理第4页

2.1乳糖操纵元（lacoperon）大肠杆菌利用乳糖最少需要需要两个酶：促使乳糖进入细菌的乳糖透过酶(lactosepermease)和催化乳糖分解第一步的β－半乳糖苷酶(β-galactosidase)。在环境中没有乳糖或其它β-半乳糖苷时，大肠杆菌合成β-半乳糖苷酶量极少，加入乳糖或其类似物2-3分钟后，细菌大量合成β-半乳糖苷酶，其量可提升千倍以上，在以乳糖作为唯一碳源时，菌体内的β-半乳糖苷酶量可占到细菌总蛋白量的3%。第5页

2.1乳糖