RNA-的提取琼脂糖电泳及RTPCRPPT课件.pptVIP

..*（8：00~8：05)实验回顾实验一、基因组DNA的提取、酶切及电泳.*目的DNA片段质粒TA载体连接重组质粒目的DNA转化无质粒的E.Coli死亡有质粒的E.Coli存活含抗生素培养基中生长PCR2-3min平板筛选.*实验二RNA提取、逆转录PCR实验内容1、小鼠肝脏组织总RNA的提取；2、RNA的琼脂糖凝胶电泳；3、以总RNA为模板的逆转录反应；4、以cDNA为模板的特定基因的RT-PCR:注：本次实验扩增GAPDH基因(746bp)5.PCR产物的电泳及回收（8：05~8：15)教师要有下午电泳时播放的多媒体PCRFlash动画PCR在法医学上的应用.*RNA提取操作注意事项RNA分离的关键因素是减少RNA酶污染。RNA酶是一类自然界中广泛存在、生物活性非常稳定的酶类。环境中的灰尘、人体汗液、唾液、实验器材表面。RNase耐热、耐酸、耐碱，不需要辅助因子就具有活性作用。1、尽量避免外源性RNase污染a.操作环境空气洁净。带手套、口罩。b.用新开封的化学试剂。（试剂应该专用）