家蚕自噬相关基因BmATG5过表达载体构建及表达效率验证.docx

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家蚕自噬相关基因BmATG5过表达载体构建及表达效率验证

摘要采用生物信息学方法对家蚕自噬相关基因BmATG5(NCBINo.100216348)进行分析，并根据cDNA序列设计引物，以家蚕的中肠组织cDNA为模板进行PCR扩增，将pMD19-T载体与PCR扩增产物转化连接并转化到大肠杆菌DH5α中，挑取阳性克隆并测序验证序列正确，再通过酶切将BmATG5从重组载体中提取出来与pIZT-mCherrry连接，将重组构建的pIZT-BmATG5-mCherry载体转入到家蚕BmN细胞中，用荧光定量PCR检测其过表达效率；结果表明，将过表达