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生物技术制药工程知识题及答案

1.基因工程药物生产中，原核表达系统与真核表达系统的核心差异体现在哪些方面？

原核表达系统（如大肠杆菌）与真核表达系统（如酵母、CHO细胞）的核心差异主要集中在以下维度：

（1）蛋白质修饰能力：原核系统缺乏内质网和高尔基体等细胞器，无法进行糖基化、磷酸化等翻译后修饰，因此对需复杂修饰的蛋白质（如抗体、病毒糖蛋白）表达效果差；真核系统具备完整的分泌途径和修饰酶系，可实现与天然蛋白一致的糖型和构象。

（2）表达产物定位：原核系统多将重组蛋白表达于胞内或周质空间，需破碎细胞提取，易形成包涵体；真核系统（如酵母、CHO）可通过信号肽将蛋白分泌至培养基，简化下游纯化流程。

（3）遗传背景复杂性：原核基因组简单，遗传操作便捷（如质粒转化效率高），但存在内毒素（如脂多糖）污染风险；真核系统基因组庞大，稳定转染株构建周期长（需筛选单克隆），但无内毒素问题，更适合治疗用蛋白生产。

（4）规模化成本：原核培养周期短（倍增时间约20分钟）、培养基成本低，适合高表达量的小分子蛋白（如胰岛素）；真核系统（尤其是哺乳动物细胞）培养条件苛刻（需CO?培养箱、血清或无血清培养基）、周期长（倍增时间18-24小时），但可生产结构复杂的大分子药物（如单克隆抗体）。

2.单克隆抗体制备中，杂交瘤技术的关键步骤包括哪些？各步骤的技术要点是什么？

杂交瘤技术的核