DNA重组的的基本操作.pptxVIP

GENETICENGINEERINGDNA重组的基本操作基因工程核心操作程序系统解析

Contents课程目录DNA重组技术的四个核心步骤01目的基因的获取02基因表达载体的构建03目的基因导入受体细胞04目的基因的检测与鉴定

CHAPTER01目的基因的获取基因工程操作的前提——从文库筛选到PCR扩增与化学合成

CHAPTER02·DNA重组技术目的基因概述与获取策略目的基因是基因工程操作中需要被克隆、转移和表达的目标DNA片段，主要包括编码蛋白质的结构基因和调控基因表达的调控因子。获取目的基因是全部操作的前提，需根据基因序列已知程度、基因大小和实验条件选择最优技术路线。结构基因与调控序列目的基因以结构基因为主，如抗虫Bt毒蛋白基因、人胰岛素基因等，也包含启动子、终止子等调控序列。Bt·胰岛素获取策略三因素获取策略取决于三个关键因素：目标基因的核苷酸序列是否已知、基因片段的长度大小、以及实验室的设备条件。序列·长度·设备三种主流方法基因文库适合未知序列筛选，PCR适合已知序列快速扩增，化学合成适合短片段精准定制，各有适用场景。文库·PCR·合成

GENELIBRARY基因文库的构建与分类基因文库是将某种生物的不同DNA片段导入受体菌群体中储存而形成的基因集合，相当于该生物的基因图书馆。根据包含基因的范围不同，可分为基因组文库和部分基因文库（cDNA