生化实验三果蔬中蛋白质含量测定.pptVIP

生物化学实验

第一部分

果蔬成分的生化分析;综合实验一:

果蔬成分的生化分析;实验材料：

冬枣＋柚子——1～4组

梨（2个品种)——5～8组

盘菜＋萝卜——9～12组;实验三

果蔬中蛋白质含量的测定

（考马斯亮蓝法);一、目的

1、掌握蛋白质测定的方法和技术。

2.了解果蔬中蛋白质的含量。;二、原理

考马斯亮蓝G-250在酸性游离状态下呈棕红色,最大光吸收在465nm,当它与蛋白质结合后变为蓝色,最大光吸收在595nm。

在一定的蛋白质浓度范围内,蛋白质-染料复合物在波长为595nm处的光吸收与蛋白质含量成正比,通过测定595nm处光吸收的增加量可知与其结合蛋白质的量。;三、实验器材

1、可见光分光光度计

2、旋涡混合器

3.试管16支;四、实验试剂

1、标准蛋白质溶液——牛血清清蛋白(bsa)：

配制成1.0mg/mL和0.1mg/mL的标准蛋白质溶液。

2、考马斯亮兰G-250染料试剂：

称100mg考马斯亮兰G-250，溶于50mL95%的乙醇后，再加入120mL85%的磷酸，用水稀释至1L。

3、0.05mol/LTris-HCl缓冲液（pH6.8）

4.各种果蔬;五、操作

1.标准曲线绘制：

取6支试管，按下表加入各试剂。;加入考马斯亮蓝G-