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基因编辑荧光报告系统的建立

摘要

随着基因编辑技术的发展，特别是近年来CRISPR/Cas9技术的出现，使基因编辑技术简便易行，从而为重大疾病的基因治疗和细胞治疗提供了一个新的技术突破点。但是基因编辑在基因组不同位点效率不同，为我们基因治疗造成一定困难。针对这个问题，我们拟设计一个基因编辑荧光报告系统，通过荧光表达效率来评价基因编辑效率。首先，我们构建了piggybac转座子为基础的PB-CAG-puro-T-sfGFP荧光报告载体，puro为筛选基因，T为基因编辑的Target序列，sfGFP是绿色荧光基因。Target位点和sfGFP基因之间是终止密码。然后