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PCR实验室操作规范

一、实验室分区管理规范

1.1分区设置要求

PCR实验室必须严格设置四个独立物理分区，各区域间配备缓冲间，缓冲间双门互锁，同一时间仅能开启单扇门，各区空气绝对禁止交叉流通。四个分区具体参数如下：

试剂准备区：面积不小于10㎡，洁净度要求万级，压差相对外界为+15Pa，温度控制在20~25℃，相对湿度30%~60%。区域内仅存放PCR反应所需的引物、探针、dNTP、无核酸酶水、反应缓冲液等未接触样本的试剂，禁止任何样本、扩增产物进入。

样本制备区：面积不小于15㎡，洁净度要求万级，压差相对试剂准备区为-5Pa、相对扩增区为+10Pa，温度20~25℃，相对湿度30%~60%。区域内仅处理待检测样本，包括样本签收、核酸提取、核酸加样操作，禁止扩增产物、已配置完成的反应体系进入。

扩增区：面积不小于10㎡，洁净度要求十万级，压差相对样本制备区为-10Pa、相对产物分析区为+5Pa，温度18~30℃（以扩增仪说明书要求为准），相对湿度30%~70%。区域内仅放置荧光定量PCR仪、普通PCR仪等扩增设备，仅可加入待扩增的密封反应体系，禁止原始样本、游离扩增产物进入。

产物分析区：面积不小于10㎡，洁净度要求十万级，压差相对外界为-20Pa，是全实验室压力最低区域，温度18~28℃，相对湿度30%~70%。仅开展凝胶电泳、测序、产物纯化等扩增后操作，所有产物废弃物必须经