巢式PCR-RFLP检测ALDH2基因rs671多态位点的实验研究.docx

巢式PCR-RFLP检测ALDH2基因rs671多态位点的实验研究

【摘要】目的：建立一种简便、快速、低成本及高准确性的检测ALDH2基因rs671多态位点的方法。方法：以粗处理的口腔上皮细胞为模板，以巢式PCR、RFLP技术为基础，设计两种不同的方案进行平行对照实验，第一种方案扩增432bp的靶片段使用代号为T的内切酶进行分型，第二种方案扩增372bp的靶片段使用代号为H的内切酶进行分型，对PCR参数和酶切条件进行优选。结果：两种方案都能获得清晰的电泳图谱用于基因分型，将100例样本的平行检测分型结果进行2检验，P=0.80＞0.05，表明采用两种不同酶制作的RFLP图谱分型结果