器官芯片流体剪切力试验规范.docVIP

器官芯片流体剪切力试验规范

1.试验前准备规范

1.1器官芯片模型确认

试验开展前需对器官芯片的细胞来源、培养周期、功能表征结果进行三重核验。细胞需经过STR分型鉴定，无支原体、真菌、细菌污染，原代细胞的传代次数不得超过5代，细胞系的使用代数需控制在已验证的功能稳定区间内。器官芯片的三维结构需通过显微成像确认，微通道的尺寸偏差不得超过设计值的±5%，基质胶的包被厚度需在20-50μm区间内，细胞接种密度需根据不同器官类型确定：肝脏芯片接种密度为1×10^6cells/cm2，肾脏芯片为8×10^5cells/cm2，肺芯片为5×10^5cells/cm2，血管芯片为2×10^6cells/cm2。

芯片功能验证需包含特异性标志物表达检测：肝脏芯片需检测白蛋白分泌、CYP450酶活性，肾脏芯片需检测肾小管上皮细胞的megalin表达、肌酐重吸收效率，肺芯片需检测表面活性蛋白SP-A、SP-B的分泌，血脑屏障芯片需检测跨内皮电阻抗（TEER）值≥1000Ω·cm2。未通过功能验证的芯片不得进入流体剪切力试验环节，同一批次试验的芯片功能指标变异系数需控制在15%以内。

1.2流体控制系统校准

流体剪切力加载系统需在每次试验前进行全参数校准。蠕动泵的转速校准需使用高精度流量计，流量输出误差不得超过设定值的±3%，脉动频率偏差不得超过±0.1Hz。注射泵的推进速率校准需使用