鸡胚成纤维细胞的制作与培养-(2).pptVIP

鸡胚成纤维细胞的制作与培养实验八实验目的:了解原代细胞培养的原理，掌握鸡胚成纤维细胞的体外培养方法。实验用途:细胞培养是病毒学研究的重要手段，是进行病毒性疾病诊断必不可少的工具。病毒能在易感的组织和单层细胞内增殖，并可产生细胞病变。细胞培养可分为原代细胞培养、传代细胞培养。实验原理:原代细胞培养是体外制备细胞培养物的必经过程，自供体体内取出组织分散单个成单个细胞接种于培养液中为初次培养，从初次培养到第一次传代培养为原代细胞培养。由组织刚刚分离出来的细胞能够分裂增殖，形成单层细胞。实验仪器：CO2培养箱、超净工作台、倒置显微镜、水浴箱、37℃培养箱实验材料：蛋架、酒精灯、酒精碘酊棉球、试管架、消毒水等。已灭菌的材料：细胞培养瓶(5-7mL)、吸管(巴氏吸管)、三角瓶、平皿若干、漏斗、4层纱布（在漏斗里面)、手术剪、镊子（装在铝饭盒)、烧杯、离心管、注射器等。鸡胚：9~11日龄消化液：含0.25％胰蛋白酶（预先置于37℃温箱中)培养基：用DMEM培养基(含5-10%胎牛血清,100单位双抗)Hanks液：洗胚及吹打用实验方法1.取胚及剪碎:将胚蛋气室端向上直立于蛋座上，用碘酊酒精棉消毒气室，以镊子击破卵壳，撕开卵膜、撕破绒尿膜、羊膜，取出胚胎于灭菌平皿中。剪去头部、翅爪及内脏，Hanks液洗去体表血