Realtime-PCR检测原理和问题处理.pptVIP

精选2021版课件*定量PCR的数学原理定量PCR的化学原理定量PCR的光学原理精选2021版课件*精选2021版课件*精选2021版课件*荧光PCR区别于其他PCR方法主要

有以下优点

1)全封闭反应,无需PCR后处理

2)特异性强,灵敏度高

3)采用对数期分析,摒弃终点数据,定量准确

4)定量范围宽,可达到10个数量级

5)仪器在线式实时监测,结果直观,避免人为判断

6)可实现一管双检或多检

7)操作安全,缩短时间,提高效率

8)利于自动化和联网管理精选2021版课件*定量PCR常见问题处理精选2021版课件*扩增曲线-AmplificationPlot精选2021版课件*标准曲线-StandardCurve精选2021版课件*原始数据-Component精选2021版课件*各波长的原始信号-Spectra精选2021版课件*融解曲线-Dissociation精选2021版课件*定量PCR实验中的10个常见缺陷1.引物或探针的设计不过关2.RNA模板质量差3.没有使用预混液”，导致差异的累积4.发生污染5.没有使用无逆转录酶的阴性对照，排除基因组DNA的干扰6.选取了不恰当的内参基因”7.在使