沉淀与共沉淀(liu ZR).ppt

分离技术 沉淀与共沉淀分离法 . 对分离的要求： 1）干扰组分应减小至不再干扰被测组分的测定； 2）被测组分在分离过程中的损失要小到可以不计。 被测组分A的回收率（RA）： 沉淀 从液相中产生一个可分离的固相的过程，或指从过饱和溶液中析出的难溶物质。 沉淀作用表示一个新的凝结相的形成过程，或由于加入沉淀剂使某些离子成为难溶化合物而沉积的过程。 产生沉淀的化学反应称为沉淀反应。 溶度积常数：物质的沉淀和溶解是一个平衡过程，通常用溶度积常数KSP来判断难溶盐是沉淀还是溶解。溶度积常数是指在一定温度下，在难溶电解质的饱和溶液中，组成沉淀的各离子浓度的乘积为一常数。各种难溶盐有不同的溶解度，通过测定难溶盐在纯水中的溶解度，便可以算出溶度积。它决定了从溶液中可分离出组分的限度，这在分离科学上经常应用。 沉淀的结构类型：可分为晶形沉淀和非晶形沉淀两大类。非晶形沉淀又称为无定形沉淀或胶状沉淀 如硫酸钡是典型的晶形沉淀，Fe2O3·nH2O是典型的非晶形沉淀 它们之间虽无绝对界限，但仍有明显差异。晶形沉淀颗粒大，直径约在0.1～1微米之间，内部排列较规则，结构紧密，易于沉降和过滤；非晶形沉淀颗粒很小，其直径通常小于0.02微米，没有明显的晶格，排列杂乱，结构疏松，体积庞大，易吸附杂质，难以过滤，也难以洗干净。 沉淀的形成过程很复杂，至今尚不完全了解沉淀形成的机理。实验证明，沉淀和颗粒的类型、大小，既取决于物质的本性，又取决于沉淀的条件。 沉淀条件：在实际工作中，必须根据不同的沉淀类型选择不同的沉淀条件，以获得合乎要求的沉淀。①对于晶形沉淀，主要是创造条件以生成较大的晶粒，避免形成能穿透滤纸的微小结晶。②对于无定形沉淀，主要是加速沉淀微粒凝聚、防止形成胶体溶液，力争获得含水少、结构较紧密的沉淀。 共沉淀的产生 ①表面吸附。由于沉淀表面的离子电荷未达到平衡，它们的残余电荷吸引了溶液中带相反电荷的离子。这种吸附是有选择性的：首先吸附晶格离子；其次，凡与晶格离子生成的盐类溶解度越小的离子，就越容易被吸附；离子的价数愈高，浓度愈大，则愈容易被吸附。升高溶液温度，减小沉淀的表面积，可减小吸附。 ②包藏。在沉淀过程中，如沉淀剂较浓，又加入过快，则沉淀颗粒表面吸附的杂质离子来不及被主沉淀的晶格离子取代，就被后来沉积上来的离子所覆盖，以至杂质离子陷入沉淀的内部，称为包藏，又叫吸留。由包藏引起的共沉淀也遵循表面吸附规律。 ③生成混晶。如果晶形沉淀晶格中的阴、阳离子被具有相同电荷的、离子半径相近的其他离子所取代，就形成混晶。??? 共沉淀分离法的历史及优势 一种古老的分离方法 为放射化学发展作出了巨大贡献 但是由于方法简便，实验条件易于满足，共沉淀分离法在微量元素或放射性核素分析中仍应用广泛 良好的选择性 定量性，能定量沉淀微痕量物质 不干扰测定（或者至少易被除去或掩蔽） 便于与母液分离，易洗涤和过滤 共沉淀效率高 混晶共沉淀 吸附共沉淀（包藏，吸留） 形成单质晶核的共沉淀 形成化合物的共沉淀 有机共沉淀 有机共沉淀剂可用强酸强氧化剂破坏，或用灼烧挥发，易消除干扰 选择性高 载体分子量大，富集效率高 生物大分子的沉淀分离 中性盐沉淀（盐析法）：各种蛋白质和酶的分离纯化 有机溶剂沉淀：蛋白质和酶、多糖、核酸以及生物小分子的分离纯化 选择性沉淀（热变性沉淀和酸碱变性沉淀）：除去某些不耐热的和在一定pH值下易变性的杂蛋白 等电点沉淀：氨基酸、蛋白质及其他两性物质的沉淀，但此法单独应用较少，多与其他方法结合使用 有机聚合物沉淀： 是发展较快的一种新方法， 主要使用PEG聚乙二醇（Polyethyene glycol）作为沉淀剂 中性盐沉淀（盐析法） 在溶液中加入中性盐使生物大分子沉淀析出的过程称为“盐析”。除了蛋白质和酶以外，多肽、多糖和核酸等都可以用盐析法进行沉淀分离，20％～40％饱和度的硫酸铵可以使许多病毒沉淀，43％饱和度的硫酸铵可以使DNA和rRNA沉淀，而tRNA保留在上清液。 盐析法应用最广的还是在蛋白质领域，已有八十多年的历史，其突出的优点是： ①成本低，不需要特别昂贵的设备。②操作简单、安全。③对许多生物活性物质具有稳定作用。 中性盐沉淀蛋白质的基本原理 蛋白质和酶均易溶于水，因为该分子的-COOH、-NH2和-OH都是亲水基团，这些基团与极性水分子相互作用形成水化层，包围于蛋白质分子周围形成1nm～100nm颗粒的亲水胶体，削弱了蛋白质分子之间的作用力，蛋白质分子表面极性基团越多，水化层越厚，蛋白质分子与溶剂分子之间的亲和力越大，因而溶解度也越大。 亲水胶体在水中的稳定因素有两个：即电荷和水膜。 因为中性盐的亲水性大于蛋白质和酶分子的亲水性，所以加入大量中性盐后，夺走了水分子，破坏了水膜，暴露出疏水区域，同时又中和了电荷，破坏了亲水胶体，蛋白质分子即