甜菜碱选择性开放钙离子通道升高小鼠脾淋巴细胞内钙浓度研究.doc

甜菜碱选择性开放钙离子通道升高小鼠 脾淋巴细胞内钙浓度研究 季宇彬1,2，冯小燕1,2，高世勇1,2 1.哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究中心药物研究所博士后科研工作站，哈尔滨150076； 2.国家教育部抗肿瘤天然药物工程研究中心，哈尔滨150076） 摘要：研究甜菜碱对小鼠脾淋巴细胞内钙离子浓度的变化及相关钙通道的研究。应用激光共聚焦显微镜(LSCM)测小鼠脾淋巴细胞内钙浓度的变化，应用不同钙通道阻滞剂研究甜菜碱影响细胞内钙浓度变化途径。对终浓度4mM甜菜碱作用淋巴细胞不同时间的细胞内钙离子浓度值分析表明：甜菜碱可以使淋巴细胞内Ca2＋浓度升高硝苯地平地尔硫卓咪贝地尔雀异黄素维拉帕米新霉素肝素L-型电压门控钙通道α1亚单位而引起外钙内流；（2）通过影响胞内钙库的IP3R钙通道RyR钙通道Ca2＋The Investigation of Calcium Channel of Betaine on Mouse Splen-lymphocytes proliferation in Vitro JI yu-bin1,2, FENG xiao-yan1,2, GAO shi-yong1,2 (1. Center of Research and Development on Life Sciences and Environmental Sciences, Harbin University of Commerce. Harbin 150076, China. 2. Engineering Research Center of Natural Anticancer Drugs, Ministry of Education. Harbin 150076, China) Abstract: Objective To investigate the effects of Betaine on splen-lymphocytes intracellular Ca2＋ concentrationorrelated calcium channel in vitro. To observe the effects of the Betaine on the [Ca2＋]i by LSCMCa2＋Ca2＋ channel blockernalyzing the intracellular [Ca2＋etaine can increasing the intracellular [Ca2＋nalyzing the intracellular [Ca2＋i with Ca2+ channel blocker, the result is Nifedipine、 Diltiazem、 Mibefradil、 Genistein can not affect the role of betaine increasing lymphocytes intracellular [Ca2＋Verapamil、Heparin、Neomyci-sulfate、Procaine can block the role of betaine increasing lymphocytes intracellular [Ca2＋intracellular [Ca2＋i. and the way of increasing intracellular [Ca2＋(1)It can influence the α1-subunit of L-VDC which is affected with G-protein. (2)It can increasing intracellular [Ca2＋influencing IP3R Ca2＋RyR Ca2＋Key words: Betaine；intracellular Ca2＋；Ca2+ channel blocker甜菜碱是一种季氨型生物碱，又名甘氨酸甜菜碱、三甲基甘氨酸等，化学名称为N-N-N-三甲基甘氨酸内盐，其化学结构与氨基酸、胆碱相似。甜菜碱本身是动物体内的代谢中产物，经大量试验证明，甜菜碱及其盐类无毒、无害、无污染，其小鼠半数致死量（LD50）在11000mg/kg，对动物无致畸、致癌、致突变作用，是公认的安全物质促进脂肪代谢促进蛋质的合成。T淋巴细胞激活的途径有多种，其早期变化的重要现象之一就是细胞内游离钙离子浓度的增加。同样B细胞活化所发生的早期变化之一也是细胞内游离钙离子浓度的升高。因此，测定甜菜碱作用下淋巴细胞内Ca2+浓度的变化对研究甜菜碱免疫调节作用的机制具有十分重要的意义。1 试验材料 CO2培养箱激光共聚焦显微镜Leica公司 Olympus IX70倒置显微镜Olympus公司电子天平Ohaus公