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【标题】不同NAA浓度对豌豆茎尖生长组织起源的研究 【作者】蔡 方 群 【关键词】萘乙酸??胚性愈伤组织??体细胞胚胎 【指导老师】陈 春 【专业】生物科学 【正文】1?引言萘乙酸是一种和植物生长素(天然的)功能相似的、人工合成的有机化合物,是一种类生长素。所以也有促进生长(低浓度)及抑制生长(高浓度)的二重性。在植物组织培养中NAA浓度起着重要的作用。豌豆与一般蔬菜有所不同,所含的止权酸、次霉素和植物激素等物质,具有抗菌消炎,增强新陈代谢的功能。在豌豆外植体的筛选试验中,茎是组织培养最佳材料,易形成愈伤组织。所以我们研究不同浓度的NAA对豌豆茎尖组织起源的影响。通过研究可以让人们进一步了解豌豆植物茎尖对NAA的敏感程度。对不同浓度NAA对豌豆茎尖组织起源影响的研究,可以掌握生长素对植物愈伤组织生长量多少的关系,显著提高目标产物的质量。此外,掌握好NAA与组织起源的关系可以提高组织培养的技术,使实际生产的过程简单化和快捷化,改进快速繁殖的方法。生物技术的进步还能使人们有目的的获取所需要的活性物质,现在脱毒技术已经在生产中广泛应用,可以用于大规模种植经济作物,药用植物等。对于节约和充分利用土地,获取更多的有益化合物具有重要意义。植物组织培养[1]是20世纪30年代初期发展起来的一项生物技术,是指在无菌条件下,将离体的植物器官(如根尖、茎尖、叶、花、未成熟的果实、种子)、组织(如形成层、花药组织、胚乳、皮层)、细胞(如体细胞、生殖细胞)、胚胎(如成熟和未成熟的胚)、原生质体(如脱壁后仍具有生活力的原生质体),培养在人工配制的培养基上,通过细胞的分裂、增殖、分化、发育,最终长成完整再生的植株的过程。进入60年代以后[2],组织培养技术在基础理论、实际操作方面不断取得进展,相继在植物体细胞杂交、单倍体育种、种质资源保存、快速育苗、人工种子制造、次生代谢物生产等方面有了可喜的成果。时至今日,组织培养技术已经成为基础坚实、易于掌握、应用面广的一种技术手段。在国内外对植物组织培养的研究很多,但针对豌豆的植物组织培养的研究较少,对豌豆的组织起源研究就更少。豌豆属豆科,是一种营养性食品,特别是含铜、铬等微量元素较多,铜有利于造血以及骨骼和脑的发育;铬有利于糖和脂肪的代谢,能维持胰岛素的正常功能。豌豆中所含的胆碱、蛋氨酸有助于防止动脉硬化;而且豌豆鲜品所含的维生素C,在所有鲜豆中名列榜首。在豌豆荚和豆苗的嫩叶中富含能分解体内亚硝胺的酶,可以分解亚硝胺,具有抗癌防癌的作用。在荷兰豆和豆苗中含有较为丰富的膳食纤维,可以防止便秘,有清肠作用。豌豆所含植物血球凝集素与菜豆、扁豆所含凝集素的作用类似,能凝集人体的红细胞,促进有丝分裂;能激活肿瘤病人的淋巴细胞,产生淋巴毒素,所以具有抗癌的作???????用。我们可以通过利用豌豆茎尖的组织培养技术,对豌豆进行快速繁殖或提取我们需要的化合物。为工业生产提供高质高产的品种;为医学培养药用的品种;为人们长年不断提供高营养的豌豆幼嫩的茎叶。为了探明豌豆茎尖组织起源的规律和机理,科学家开展了多种影响因子对其的研究,这多种影响因子,一般是细胞生长素(如2,4-D、IIA、NAA),细胞分裂素(如Kt,6-BA)。其中以NAA对茎尖愈伤组织的增殖与分化影响最大,我们就针对不同浓度NAA对豌豆茎尖组织起源的影响进行研究。旨在分析各种浓度的NAA对豌豆茎尖组织起源的影响,找出组织起源所需的最适NAA浓度,从而为不同生产提供数据,寻找一种快速、高效、稳定的种苗繁殖方法。对不同浓度NAA对豌豆茎尖组织起源影响的研究,一般是在培养基上,加上不同浓度的NAA,然后对豌豆茎尖进行植物组织培养。目前国内外的植物组织培养大多是用MS培养基、CC培养基、NB培养基、N6培养基等。每种培养基的作用不同,其中MS培养基的特点是无机盐的浓度高,有加速愈伤组织生长的作用,能满足植物组织对矿质营养的要求。这是目前应用最广泛的一种培养基。培养过程中,不同植物或同一植物不同器官和部位的培养效果往往存在明显的差异,这主要是由于培养条件引起激素水平以及组织内部成分变化所致。许多研究表明[3],内源IAA, GA, ABA、多胺等与愈伤组织形成和分化具有密切的关系。内源激素通过调控细胞或组织的基因活动,从而影响一系列代谢过程,最终影响植物终细胞胚性潜力的诱导、维持和表达。李雪梅等的研究[4]认为只有细胞中含有较高浓度的生长素NAA才能保证细胞分裂的启动和胚性潜力的诱导。陈以峰等[5]认为内源IAA含量的增加有利于水稻胚性愈伤组织的形成。郭子彪等[6]以大豆子叶作为外杭休接种于MS加外源生长物质的培养基中,结果发现:内源IAA高的品种愈伤组织生长较快,而分化过程中的胚性愈伤组织ABA和IAA含量高于非胚性愈伤组织。张明方在研究番
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