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实验原理 1.还原糖 砖红色沉淀 橘黄色 红色 3.蛋白质 紫色 斐林(Feling)试剂 沸水浴 苏丹Ⅲ染液 苏丹Ⅳ染液 2.脂肪— 双缩脲试剂 1.还原糖的鉴定 选材:含糖量较高、白色或近于白色的植物组织 制备组织样液 洗涤、去皮、切块 ↓ 研磨:少量石英砂+5 mL H2O ↓ 过滤(用一层纱布) ↓ 收集组织样液 实验步骤 (注:斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后使用) 呈色反应 结论:组织中有还原糖 实验关键:斐林试剂的现用现配及其用量 实验步骤 实验步骤 2.脂肪的鉴定 取材:花生种子(浸泡3~4 h),将子叶削成薄片 制片 ①取最理想的薄片 ②在薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ染液(2~3 min) ③去浮色(用50%酒精) ④制成临时装片 观察:在低倍镜下找到已着色的圆形小颗粒, 然后用高倍镜观察,可看到橘黄色圆形小颗粒 结论:组织中含有脂肪 实验关键:子叶应切成薄片。 3.蛋白质的鉴定 选材与制备 组织样液:卵清或黄豆(浸泡1~2 d) 呈色反应 结论:组织样液中含有蛋白质 实验关键:若用卵清蛋白,必须稀释(10倍) 实验步骤 实验关键 1.实验材料的选择 (1)还原糖的鉴定实验,最理想的实验材料是含糖量较高的生物组织(或器官),而且组织的颜色较浅,或近于白色的。经试验比较,颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。 (2)脂肪的鉴定实验,实验材料最好选用富含脂肪的种子,且徒手切片要薄。 (3)蛋白质的鉴定实验,最好选用富含蛋白质的生物组织,植物材料常用的是大豆,动物材料常用的是鸡蛋。 实验关键 2.斐林试剂与双缩脲试剂的比较分析 比较项目 斐林试剂 双缩脲试剂 不 同 点 使用 方法 甲液和乙液混合均匀后方可使用,且现配现用 使用时先加A液再加B液 呈色反应条件 需加热煮沸 不需加热即可反应 反应 原理 还原糖中的醛基被Cu(OH)2氧化,Cu(OH)2被还原为Cu2O 具有两个以上肽键的化合物在碱性条件下与Cu2+反应生成络合物 颜色 砖红色 紫色 浓度 乙液CuSO4浓度0.05 g/mL B液CuSO4浓度0.01 g/mL 相同点 都含有NaOH、CuSO4两种成分,且所用NaOH浓度都是0.1 g/mL 实验关键 章末网络构建
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