医学论文：hplc法测定红穿破石中大黄素的含量.docVIP

【摘要】? 目的 建立红穿破石中大黄素含量的高效液相色谱测定方法。方法 选用eclipse xdb-c18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),以甲醇-0.1%磷酸溶液(7525)为流动相,检测波长为285 nm。结果 大黄素在0.0063～0.063 μg范围内呈良好的线性关系(r＝0.999 9),平均回收率为102.0%,rsd＝1.58%(n＝6)。结论 本法简便,准确,可用于红穿破石中大黄素的含量测定。 【关键词】? 红穿破石；大黄素；高效液相色谱法 ??? abstract：objective to establish a hplc method for determining emodin in radix et caulis ventilaginis leiocarpae. methods stationary phase was agilent eclipse xdb-c18 (4.6 mm×150 mm, 5 μm), mobile phase was methanol-0.1%phosphoric (75∶25), detection wavelength was 285 nm, flow rate was 1.0 ml/min and column temperature was 30 ℃. results there was good linearity in the range of 0.006 3～0.063 μg for emodin (r＝0.999 9). the average recovery of emodin was 102.0% with rsd＝1.58%. conclusion this method is rapid and accurate. it can be applied to control the quality of radix et caulis ventilaginis leiocarpae.?? 　　key words：radix et caulis ventilaginis leiocarpae；emodin；hplc???? 红穿破石为鼠李科植物翼核果ventilago leiocarpa benth.的干燥根和老茎,主产于广西等地1,具有清热利湿、利尿通淋的作用,特别是对消石具有特殊功效,民间常用于尿路感染、急慢性肾炎、肾结石的治疗,现已有多个制药厂家把它作为治疗结石症的重要组方。王氏等2报道,从广西产红穿破石根和茎中分离到大黄素、大黄素甲醚、1,2,4,8-四羟基-3-甲基蒽醌、翼核果醌-?、翼核果素,其中大黄素为该植物的主要化学成分。有关红穿破石的主成分含量测定尚未见报道。本试验采用hplc法对红穿破石中大黄素进行含量测定,为药材生产和质量标准提供科学依据。　　1? 仪器与试药??? 　　美国agilent1100系列高效液相色谱仪(包括四元泵,自动进样器,脱气机,紫外可见检测器,柱温箱和agilent1100化学工作站),bug40型超声波清洗器(上海必能信有限公司)。??? 　　大黄素对照品(批号110756-200110,含量测定用)由中国药品生物制品检定所提供,纯度在98%以上；红穿破石由广西玉林制药有限责任公司提供,来源于广西各地,经广西玉林制药有限责任公司中药鉴定室专家鉴定。水为重蒸馏水,甲醇为色谱纯,其余试剂均为分析纯。　　2? 方法与结果　　2.1? 色谱条件?? 　　agilent eclipse xdb-c18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5 μm)；流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(7525)；流速：1.0 ml/min；检测波长：285 nm；柱温：30 ；进样量：10 μl。理论板数按大黄素计算应不低于3 000。在此色谱条件下,红穿破石样品能够达到基线分离(见图1)。　　2.2? 对照品溶液的制备 ??? 精密称取大黄素对照品适量,加甲醇制成每1 ml含大黄素6.3 μg的溶液,作为对照品溶液。　　2.3? 供试品溶液的制备 ??? 取红穿破石粉末适量,取0.4 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50 ml,称定重量,超声30 min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,滤液用微孔滤膜(0.45 μm)滤过,取续滤液,作为供试品溶液。　　2.4? 线性关系的考察 ??? 分别精密吸取大黄素对照品溶液(6.3 μg/ml)1、2、4、6、8、10 ml,置于10 ml容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,各进样10 μl,连续进样2次,测定峰面积。以对照品进样量(μg)为横坐标,峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,得回归方程：y＝4 172.28a＋0.46,r＝0.999