医学论文：红景天多糖对老年小鼠免疫功能的影响.docVIP

?????????????????????????? 作者：罗文哲 王建杰 阮阳 商宇【摘要】? 目的 探讨中药红景天多糖在免疫功能调节方面的作用机制。方法 应用流式细胞技术、放射免疫和elisa方法检测老年小鼠免疫功能t淋巴细胞亚群，外周血白介素?2（il?2）含量及免疫球蛋白g（igg）的含量。结果 红景天多糖对老年小鼠t淋巴细胞亚群、外周血il?2含量及抗体形成均有增强作用（p 0.05）。结论 红景天多糖能够提高老年小鼠的免疫功能，是一种良好的免疫调节剂。 【关键词】? 红景天多糖；tlc亚群；il?2；igg 红景天含有多种生物活性成分，有良好的抗疲劳、抗衰老、抗缺氧、抗氧化作用〔1〕。大量研究证实红景天中所含的多糖成分具有特殊而明确的生理活性和药理作用。本实验通过检测老年小鼠t淋巴细胞亚群的数目和比值，白介素?2(il?2)的活性及igg含量，探讨红景天多糖对老年小鼠免疫功能的调节作用。 ??? 1? 材料与方法 ??? 1.1? 主要试剂与药品? 抗小鼠cd3、cd4、cd8单克隆抗体：北京医科大学免疫系；il?2试剂盒：解放军总医院科技开发中心放免所； igg酶联免疫试剂盒：北京邦定生物试剂公司；红景天：佳木斯药材公司。超声波法提取红景天多糖〔2〕。 ??? 1.2? 实验方法? 昆明系小鼠30只、清洁级，雌雄各半，青年组2月龄10只,体重（20±2）g,老年组12月龄20只,体重(50±5）g，购于本校实验动物中心。分为3组，每组10只，青年对照组:生理盐水0.5 ml灌胃；老年小鼠模型组：生理盐水0.5ml灌胃；红景天多糖组：红景天多糖75 mg/kg灌胃（正常服药组）。各组连续10 d。于第11天取样检测各项免疫指标。 ??? 1.3? 指标检测 ??? ? t淋巴细胞亚群测定? 处死小鼠.取脾研磨，制成脾细胞悬液，调整细胞数为1×106/ml。将细胞悬液分别加入2个试管内，1 ml/管。第一管加入fitc标记的抗小鼠cd+3mcab 40 μl、第二管同时加入pe标记的抗小鼠cd+4mcab和fitc标记的抗小鼠cd+8mcab各20 μl，作用30 min后，加入1 ml荧光洗液，2 200 r/min离心5 min，去上清。加入1 ml荧光保存液，流式细胞仪检测各细胞亚群的比例。 ??? ? 血清il?2的检测? 采用放射免疫法测定法，按试剂盒说明书操作。 ??? ? igg检测? elisa法，按试剂盒说明书操作。 ??? 1.4? 统计学处理? 各项指标以x±s表示，通过spss10.0软件进行统计学处理，组间进行方差分析、q检验。 ??? 2? 结? 果 ??? 2.1? 红景天多糖对小鼠t淋巴细胞亚群的影响? 见表1。老年模型组与青年对照组比较，cd+4亚群的比例及cd+4/cd+8的比值降低（p＜0.05）；红景天多糖能提高老年模型组小鼠的cd+4亚群的比例，提高cd4+4/cd+8的比值（p＜0.05），与青年组水平无明显差异（p＞0.05）。??? 2.2? 红景天多糖对小鼠血清il?2和血清igg的影响? 见表2。老年模型组与青年对照组比较，il?2、igg水平明显降低（均p＜0.05）；红景天多糖能提高老年模型组小鼠的il?2及igg水平（均p＜0.05），与青年对照组水平无明显差异（p＞0.05）。表1? 对小鼠t淋巴细胞亚群的影响与老年模型组比较：1）p 0.05；下表同表2? 对小鼠血清il?2和血液igg的影响 ??? 3? 讨? 论 ??? t细胞在机体的免疫防御、免疫调节、免疫监视及免疫修复中有极为重要的作用，对于机体的自身稳定和免疫平衡至关重要。t细胞介导细胞免疫，并对体液免疫起到辅助和调节作用。t细胞具有高度的异质性，细胞表面存在着许多特异性分子,如cd+3、cd+4、cd+8等,在识别抗原过程中发挥着重要的作用。其中th细胞(cd+4)和ts细胞(cd+8)的相互协调是调控的重要环节之一。cd+4/cd+8的比值是反映机体免疫内环境是否稳定的一个重要指标,两者平衡决定了免疫反应的总效应,若比值偏离正常值,说明机体免疫功能失调。本实验表明：老年模型小鼠th(cd+4)细胞明显降低，cd+4/cd+8比值偏离青年对照组水平，提示老年模型小鼠t细胞亚群的分布发生了变化,导致小鼠t淋巴细胞免疫功能异常及免疫调节功能紊乱，造成小鼠细胞免疫功能低下。本实验证明红景天多糖可改善老年小鼠cd+4亚群比例及cd+4/cd+8比值，说明它对老年细胞免疫功能低下有较好的改善作用〔3〕。 ??? il?2在免疫应答、免疫调节、抗肿瘤免疫中具有重要作用。辅助性t细胞(cd+4)是il?2的主要来源，主要促进ctl和nk细胞增殖;促进b细胞分化和增殖。b淋巴细胞经过细胞增殖、抗原选择、免疫球